山羊副流感病毒3型NP蛋白的截短表达及间接ELISA方法的建立

作     者：陈金龙 黄兴军 郝胜楠 张德普 王金良 沈志强 CHEN Jin-long;HUANG Xing-jun;HAO Sheng-nan;ZHANG De-pu;WANG Jin-liang;SHEN Zhi-qiang

作者机构：山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600 山东绿都生物科技有限公司山东滨州256600 山东省惠民县畜牧兽医局山东惠民251700 山东省东营市河口区畜牧业发展服务中心山东东营257000 滨州学院山东滨州256600 

基　　金：山东省现代农业产业技术体系羊产业创新团队岗位专家资助项目(SDAIT-10-07) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2020年第40卷第8期

页      码：1449-1453页

摘      要：为建立山羊副流感病毒3型ELSIA抗体检测方法,利用DNAStar生物信息学软件对山羊副流感病毒3型NP蛋白抗原区域进行预测,利用Primer 6.0软件设计合成1对引物,通过RT-PCR技术扩增到807 bp基因片段,将其连接到原核表达质粒pET28a(+)中,成功表达了相对分子质量约39000的目的蛋白,以纯化后的蛋白为包被抗原,建立检测山羊副流感病毒3型的ELISA抗体检测方法,并对方法的敏感性、特异性、稳定性进行了验证。结果显示,建立的方法具有敏感性高、特异性强、稳定性好等优点;对送检的745份临床羊血清进行检测,总阳性率为14.5%。本试验建立的间接ELISA检测方法为山羊副流感病毒3型抗体的快速检测及流行病学调查提供了技术支持。

主 题 词：羊副流感病毒3型 NP蛋白 截短表达 间接ELISA 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2020.08.04

馆 藏 号：203979082...