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猪PD-1分子及其配体的实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

猪PD-1分子及其配体的实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

作     者:彭金美 李登云 田志军 安同庆 刘恒贵 周艳君 童光志 

作者机构:东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 香港大学李嘉诚医学院艾滋病研究所中国香港SAR 

基  金:国家重点基础研究发展计划(973)项目(2005CB523202) 兽医生物技术国家重点实验室自主研究项目(SKLVBP201011) 

出 版 物:《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期:2010年第40卷第4期

页      码:410-414页

摘      要:根据猪程序性死亡因子PD-1及其配体PD-L1和PD-L2的基因序列,分别设计了特异性引物和TaqMan探针,以10倍系列稀释的重组质粒pMD-PD-1、pMD-PD-L1和pMD-PD-L2为标准品,对实时荧光定量PCR的条件进行优化,以建立定量检测这3个基因的方法。结果表明,建立的方法在1×10^2-1×10^8copies/μL模板范围内具有良好的线性关系(r^2〉0.99),扩增效率均高于96%,可检测至少100 copies的阳性标准品。利用该方法对猪外周血单核细胞中这3个基因的表达情况进行了检测,结果也表明该方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,可应用于临床样品的检测。

主 题 词:实时荧光定量聚合酶链反应 PD-1基因 PD-L1基因 PD-L2基因 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 071010[071010] 081704[081704] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 071009[071009] 

核心收录:

D O I:10.16656/j.issn.1673-4696.2010.04.016

馆 藏 号:203979529...

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