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菰(Zizania latifolia)ISSR反应体系的建立及优化

菰(Zizania latifolia)ISSR反应体系的建立及优化

作     者:吴国林 王惠梅 黄奇娜 奉保华 江绍琳 吴建利 黄长干 江绍玫 

作者机构:江西农业大学南昌330045 江西财经大学南昌330045 中国水稻研究所杭州310006 

基  金:国家自然科学基金(31160271) 江西省科技支撑项目(20133BBF6005) 

出 版 物:《植物遗传资源学报》 (Journal of Plant Genetic Resources)

年 卷 期:2014年第15卷第6期

页      码:1395-1400页

摘      要:菰是一种稻族野生资源,水生或沼生,在我国有着广泛的分布。野生菰群体不仅是一种重要的育种基因资源,同时还有着巨大的生态作用。为建立适宜于菰的ISSR反应体系,以菰DNA基因组为模板对ISSR反应体系中的主要影响因子进行优化。采用单因素变量法在12个不同梯度水平上设计正交试验针对体系中d NTPs浓度、Mg2+浓度、Taq聚合酶浓度、引物浓度、模板DNA浓度及引物退火温度等6个因子进行优化,确定了在20μL ISSR反应体系中各组分的最适因素水平分别为:3.0 mmol Mg2+(10×Buffer),0.5 mmol d NTPs、1.0μmol引物浓度、0.24 U/μL Taq聚合酶、1.5 ng/μL DNA模板以及55℃退火温度。应用该优化体系对80个菰材料进行扩增,证实了该体系的适用性和稳定性,为菰遗传资源的鉴定、评价与利用提供了技术支撑。

主 题 词: ISSR 居群 

学科分类:09[农学] 0901[农学-植物生产类] 

核心收录:

D O I:10.13430/j.cnki.jpgr.2014.06.034

馆 藏 号:203981767...

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