顺铂处理的肺癌细胞NSUN 2 mRNA剪接异构体变化

作     者：吴小海 刘晓晓 张宏伟 李梦仙 温艳萍 李明阳 吴翰欣 张沛 俞建昆 WU Xiaohai;LIU Xiaoxiao;ZHANG Hongwei;LI Mengxian;WEN Yanping;LI Mingyang;WU Hanxin;ZHANG Pei;YU Jiankun

作者机构：昆明医科大学中国医学科学院医学生物学研究所云南昆明650000 中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118 昆明医科大学第二附属医院云南昆明650000 

基　　金：中国医学科学院医学与健康科技创新工程重大协同创新基金资助项目(CIFMS 2016-I2M-2-001) 

出 版 物：《贵州医科大学学报》 (Journal of Guizhou Medical University)

年 卷 期：2020年第45卷第10期

页      码：1164-1171页

摘      要：目的:探讨顺铂(CDDP)处理肺癌细胞后NSUN 2 pre-mRNA的剪接变化。方法:在NSUN 2基因的pre-mRNA有选择性剪接的外显子两侧的外显子上设计检测引物,选取16例非小细胞肺癌患者的肿瘤组织及其癌旁正常组织,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测组织NSUN 2各mRNA剪接异构体的表达;取人肺癌细胞系A549细胞和H1299细胞分别用不同浓度CDDP处理,A549细胞分为0、8、16、24、32、40、48及56μmol/L组,H1299细胞分为0、12、24、36、48、60、72及84μmol/L组,采用RT-PCR检测各组细胞NSUN 2各mRNA剪接异构体的表达;RT-PCR产物胶回收后进行TA克隆测序并与NCBI网站数据库中NSUN 2的序列进行比对分析。结果:人肺癌细胞系A549细胞和H1299细胞及肺癌临床样本中NSUN 2基因可编码蛋白的mRNA剪接异构体表达量最高,占主导地位;随着CDDP浓度增加,NSUN 2可编码蛋白的异构体在H1299细胞的高浓度组中的表达下降(P<0.01),非编码蛋白的异构体在A549细胞和H1299细胞的高浓度组中表达均上升(P<0.05);检测到2种未见报道的mRNA剪接异构体。结论:CDDP处理后肺癌细胞中NSUN 2 pre-mRNA剪接会发生变化,NSUN 2基因的表达存在pre-mRNA选择性剪接调控。

主 题 词：选择性剪接 顺铂 肺肿瘤 5-甲基胞嘧啶RNA甲基化 NOP2/Sun RNA甲基转移酶2 mRNA剪接异构体 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1001[医学-基础医学] 07[理学] 071007[071007] 10[医学] 

D　O　I：10.19367/j.cnki.2096-8388.2020.10.008

馆 藏 号：203986192...