量子点荧光猝灭免疫亲和凝胶检测柱检测番茄酱中罗丹明B的研究

作     者：胡高爽 高山 韩雪 王君 李娜 HU Gao-shuang;GAO Shan;HAN Xue;WANG Jun;LI Na

作者机构：河北科技大学生物科学与工程学院河北石家庄050000 沧州师范学院生命科学学院河北沧州061000 河北英茂生物科技有限公司河北石家庄050000 

基　　金：石家庄市科学技术研究与发展计划项目(201170283A) 河北省青年科学基金项目(C2019208188) 河北科技大学博士科研基金项目(81/1181288) 河北科技大学博士科研基金项目(81/1181289) 河北科技大学五大平台开放基金(82/1182218) 

出 版 物：《食品工业科技》 (Science and Technology of Food Industry)

年 卷 期：2020年第41卷第20期

页      码：230-234,245页

摘      要：目的:本研究根据抗原-抗体特异性识别反应和荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)的原理,构建一种基于量子点(Quantum dots,QDs)的新型荧光猝灭免疫亲和凝胶检测柱检测番茄酱中罗丹明B(Rhodamine B,RB)残留。方法:通过罗丹明B的单克隆抗体与溴化氢活化琼脂糖凝胶-4B偶联制备分析物抗体胶,设计单检测层的凝胶检测柱。基于抗原抗体的特异性结合反应,并利用罗丹明B和量子点之间的静电引力作用,构建一种新型的荧光猝灭免疫亲和凝胶检测柱。通过优化抗体添加量、量子点稀释倍数、孵育时间以及上样量等参数,最终实现番茄酱样品中罗丹明B的快速灵敏检测。结果:当1.0 g溴化氢活化的琼脂糖凝胶添加2.0 mg罗丹明B单克隆抗体,量子点溶液稀释3000倍,孵育时间控制在50 s,罗丹明B上样量为3.0 mL,该荧光猝灭免疫亲和凝胶检测柱针对罗丹明B的方法检测限(limit of detection,LOD)能够达到最小值1.0μg/L。样品分析结果表明,该方法针对番茄酱样品中罗丹明B的检测限为5.0μg/kg,并且与HPLC方法测定的结果表现出很好的一致性。结论:该方法操作简便,灵敏度高,检测时间短,结果易于判断,可以满足番茄酱中罗丹明B的现场快速检测的要求。

主 题 词：罗丹明B 量子点 荧光猝灭 免疫亲和凝胶检测柱 番茄酱 

学科分类：09[农学] 0903[农学-动物生产类] 

D　O　I：10.13386/j.issn1002-0306.2020.20.037

馆 藏 号：203986246...