牛IFN-α、IFN-β荧光定量PCR检测方法的建立

作     者：杜红 邓宇 唐颖 何学谦 DU Hong;DENG Yu;TANG Ying;HE Xue-qian

作者机构：西昌学院动物科学学院四川西昌615000 

基　　金：四川省科技厅应用基础研究面上项目(项目编号:2018JY0243) 四川省教育厅自然科学重点项目(项目编号:18ZAO442) 西昌学院“双高”项目(项目编号:LGZ201712) 

出 版 物：《畜牧兽医杂志》 (Journal of Animal Science and Veterinary Medicine)

年 卷 期：2020年第39卷第6期

页      码：10-14页

摘      要：建立一种检测牛IFN-α、IFN-β基因SYBY GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,旨在为抗病毒相关研究奠定基础。设计合成扩增牛IFN-α、IFN-β基因的特异性引物,采用RT-PCR从牛脾脏中扩增出目的DNA片段,将其克隆至pMD18-T载体获得牛IFN-α、IFN-β质粒标准品,以质粒标准品为模板,优化荧光定量PCR反应条件,建立牛IFN-α、IFN-β基因SYBY GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,结果表明,牛IFN-α、IFN-β标准曲线的R2分别为0.9588和0.99652,线性良好;扩增效率为0.97和0.91,效率高;熔解曲线均为单峰,特异性较高,并具有良好的重复。结果证实,本研究所建立的方法敏感性高,特异性强,重复性好。

主 题 词：牛 IFN-α IFN-β 荧光定量PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203987193...