多肉植物红心莲茎腐病尖孢镰刀菌LAMP快速检测技术的建立

作     者：姚锦爱 黄鹏 陈汉鑫 侯翔宇 余德亿 YAO Jinai;HUANG Peng;CHEN Hanxin;HOU Xiangyu;YU Deyi

作者机构：福建省作物有害生物监测与治理重点实验室/福建省农业科学院植物保护研究所福建福州350013 漳州市农业科学研究所福建漳州363005 

基　　金：福建省科技计划公益类专项(2018R1025-2) 福建省农业科学院项目(STIT2017-2-2、DEC201907) 

出 版 物：《福建农业学报》 (Fujian Journal of Agricultural Sciences)

年 卷 期：2020年第35卷第8期

页      码：863-868页

摘      要：【目的】建立一种景天科多肉植物红心莲茎腐病菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)快速、简便、灵敏的LAMP可视化检测方法,在茎腐病发生初期实现病原菌的快速准确检测,为病害的早期监测、诊断及防治提供依据。【方法】以EF-1a(Elongation factor-1α)基因序列为靶序列,设计LAMP(Loopmediated isothermal amplification)特异性引物;以红心莲尖孢镰刀菌DNA为模板,优化反应温度和反应时间,建立LAMP检测反应体系,开展特异性和灵敏度验证及田间病株检测。【结果】建立的LAMP反应体系可有效检测出多肉植物红心莲茎腐病尖孢镰刀菌,最佳反应温度、反应时间分别为65℃,60 min;特异性验证表明红心莲尖孢镰刀菌DNA呈绿色阳性反应,灵敏度验证表明LAMP检测最小质量浓度是10 fg·μL^-1,比常规PCR提高了10倍;采用LAMP法对15份疑似红心莲茎腐病田间样本进行快速检测,检出率为100%。【结论】本研究建立的多肉植物红心莲茎腐病菌LAMP快速检测方法不仅特异性强、灵敏度高,而且检测结果可视、假阳性低,适合田间尖孢镰刀菌引起的红心莲茎腐病的快速检测。

主 题 词：红心莲 茎腐病 尖孢镰刀菌 环介导等温核酸扩增技术(LAMP) 检测 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 090402[090402] 

D　O　I：10.19303/j.issn.1008-0384.2020.08.008

馆 藏 号：203987229...