生长抑素受体基因特异性shRNA慢病毒表达质粒的构建

作     者：李敏 郝林琳 刘松财 张永亮 LI Min;HAO Lin-lin;LIU Song-cai;ZHANG Yong-liang

作者机构：吉林大学畜牧兽医学院长春130062 华南农业大学广州510095 

基　　金：国家自然科学基金资助(编号:30571355) 

出 版 物：《现代生物医学进展》 (Progress in Modern Biomedicine)

年 卷 期：2008年第8卷第3期

页      码：421-423页

摘      要：目的:设计并合成生长抑素受体SSTR5基因siRNA序列,并构建其短发夹shRNA慢病毒表达质粒。方法:以小鼠SSTR5基因为靶序列,用在线软件分析、设计并合成其有效siRNA,退火形成双链DNA后,与经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切线性化慢病毒表达载体pSHR-Pμzro/GFP连接,产生pLV-shSSTR5重组慢病毒质粒,将重组质粒转化大肠杆菌DH 5α感受态细胞,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。结果:构建的重组表达质粒PCR产物为161bp,其中插入的SSTR5-siRNA片段为61bp,测序结果与参考序列完全一致。结论:成功构建了小鼠SSTR5基因特异性shRNA慢病毒表达质粒。

主 题 词：SSTR5 RNAi 慢病毒表达载体 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-6273.2008.03.007

馆 藏 号：203987997...