利用简并引物克隆天山雪莲sikPIP基因片段及RNAi载体的构建

作     者：孙辉 祝建波 Sun Hui;Zhu Jianbo

作者机构：石河子大学生命科学学院农业生物技术重点实验室石河子832003 

基　　金：国家"863"计划项目(2007AA021401) 国家转基因重大专项(2008ZX005-004) 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2010年第26卷第6期

页      码：107-112页

摘      要：利用NCBI、Bloekmaker、CODEHOP、Primer Premier5.0等数据库和生物软件设计简并引物并利用简并引物RT-PCR,首次从天山雪莲中克隆到474bp的PIP基因cDNA片段,命名为sikPIP,其与GenBank中非洲杂交菊PIP基因氨基酸序列的同源性高达93.0%。从上述序列中选取200bp的序列,利用2对同尾酶将正义片段和反义片段插入到植物表达载体CAM2300-35S-Ocs中,成功构建天山雪莲RNAi载体CAM2300-35S-Ocs-sikPIP。为接下来的遗传转化,进一步探明sikPIP基因在天山雪莲中的功能奠定了基础。

主 题 词：天山雪莲 sikPIP 简并引物 RNAi 

学科分类：1008[医学-中药学类] 10[医学] 

D　O　I：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2010.06.028

馆 藏 号：203988003...