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慢病毒载体介导的小鼠骨髓树突状细胞RelB基因沉默

慢病毒载体介导的小鼠骨髓树突状细胞RelB基因沉默

作     者:包杰 王前 郑磊 裘宇容 曾方银 杨春莉 黄宪章 BAO Jie;WANG Qian;ZHENG Lei;QIU Yu-rong;ZENG Fang-yin;YANG Chun-li;HUANG Xian-zhang

作者机构:南方医科大学南方医院检验医学科广东广州510515 南方医科大学南方医院院办公室广东广州510515 广东省中医院检验科广东广州510120 

基  金:广东省自然科学基金资助项目(07004832) 

出 版 物:《细胞与分子免疫学杂志》 (Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology)

年 卷 期:2008年第24卷第9期

页      码:857-860页

摘      要:目的:利用慢病毒载体沉默小鼠骨髓树突状细胞(DC)的RelB基因,建立RelB基因低表达的骨髓致耐受DC,为自身免疫病的防治提供新方法。方法:设计小鼠RelB基因干扰的靶序列R5,合成并克隆到慢病毒载体上,与慢病毒的包装材料在293FT细胞中包装成病毒颗粒,收集病毒上清,测定病毒滴度,然后包装慢病毒感染DC,RT-PCR和免疫荧光方法检测,灰度扫描并用软件分析RelB基因的表达水平,未成熟DC作对照组,选择T6包装病毒为RNAi的阴性对照。结果:RT-PCR和免疫荧光方法发现R5病毒感染的DCRelB基因表达水平与未成熟DC基因表达水平接近,低于成熟DC的表达水平(P<0.05),而实验对照T6组病毒感染的DC其RelB基因表达水平高于未成熟DC(P<0.05)和R5病毒转染DC组(P<0.05)。结论:小鼠骨髓DC表达的RelB基因被慢病毒载体有效沉默,有望成为DC免疫治疗的新载体。

主 题 词:慢病毒载体 树突状细胞 RelB基因 基因沉默 

学科分类:1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3321/j.issn:1007-8738.2008.09.004

馆 藏 号:203988275...

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