miR-324-5p通过抑制Syk/Ras/c-fos通路降低脂多糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖

作     者：王晶 祝晓丽 秦秀娟 姜辉 高雅晨 高家荣 WANG Jing;ZHU Xiaoli;QIN Xiujuan;JIANG Hui;GAO Yachen;GAO Jiarong

作者机构：安徽中医药大学第一附属医院安徽合肥230012 安徽中医药大学药学院安徽合肥230012 安徽中医药大学中药复方安徽省重点实验室安徽合肥230012 

基　　金：国家自然科学基金(81973546) 安徽省自然科学基金(1808085MH276) 

出 版 物：《南方医科大学学报》 (Journal of Southern Medical University)

年 卷 期：2020年第40卷第11期

页      码：1571-1578页

摘      要：目的探讨miR-324-5p调控Syk/Ras/c-fos信号通路对大鼠肾小球系膜(HBZY-1)细胞增殖能力的影响。方法体外培养HBZY-1细胞;设计并合成miR-324-5p mimics,miR-324-5p mimics-NC片段;采用Lipo3000试剂盒瞬时转染miR-324-5p mimics,miR-324-5p mimics-NC片段至脂多糖(LPS)诱导的HBZY-1细胞内,RT-qPCR验证转染效率;将HBZY-1细胞分为对照组(生理盐水),LPS组(LPS 0.5μg/mL),LPS+mimics组(LPS 0.5μg/mL+miR-324-mimics),LPS+mimics-NC组(LPS 0.5μg/mL+miR-324-mimics-NC);MTT法检测各组HBZY-1细胞增殖活性;RT-qPCR法检测各组细胞miR-324-5p及Syk、Ras、MEK1/2、ERK1/2、c-fos mRNA的表达;Western blot和免疫荧光法检测各组细胞p-Syk、Ras、p-MEK1/2、p-ERK1/2、c-fos蛋白的表达。结果MTT结果显示,LPS组细胞增殖水平较正常组显著升高,与LPS组及LPS+mimics-NC组相比,LPS+mimics组细胞增殖能力降低;RT-qPCR结果显示,LPS+mimics组中miR-324-5p表达明显高于LPS组及LPS+mimics-NC组,且LPS+mimics组中Syk、Ras、MEK1/2、ERK1/2、c-fos mRNA的表达显著低于LPS组及LPS+mimics-NC组,差异具有统计学意义(P<0.05);Western Blot结果显示,与LPS组及LPS+mimics-NC组相比LPS+mimics组中p-Syk、Ras、p-MEK1/2、p-ERK1/2、c-fos蛋白表达显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05);免疫荧光结果显示,与LPS组及LPS+mimics-NC组相比,LPS+mimics组p-Syk、Ras、p-MEK1/2、p-ERK1/2、c-fos蛋白标记细胞数目明显减少。结论miR-324-5p可通过抑制Syk/Ras/c-fos信号通路降低LPS诱导的慢性肾小球肾炎细胞的增殖活性,miR-324-5p有望成为慢性肾小球肾炎诊断和治疗的潜在靶标。

主 题 词：慢性肾小球肾炎 miR-324-5p Syk/Ras/c-fos信号通路 细胞增殖 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100210[100210] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.12122/j.issn.1673-4254.2020.11.06

馆 藏 号：203990880...