筛选家蚕分子标记的有效方法—SADF法

作     者：何宁佳 鲁成 周泽扬 向仲怀 He Ningjia;Lu Cheng;Zhou Zeyang;Xiang Zhonghuai

作者机构：西南农业大学蚕桑丝绸学院农业部蚕桑学重点开放实验室重庆400716 

基　　金：国家自然科学基金 

出 版 物：《蚕业科学》 (ACTA SERICOLOGICA SINICA)

年 卷 期：1999年第25卷第2期

页      码：77-81页

摘      要：从家蚕品种 Ｃ１０８ 和大造后部丝腺提取的基因组 Ｄ Ｎ Ａ 用 Ｐｓｔ Ⅰ酶解后与自行设计的人工接头相连，并用与人工接头序列相匹配的选择性引物进行选择性 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增（ Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ Ａｍ ｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ） 。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测显示，用 Ｓ Ａ Ｄ Ｆ 法在两品种中能检测到稳定的 Ｄ Ｎ Ａ 多态性片段，表明此方法可用于分子标记的筛选。经研究发现：当 Ｐ Ｃ Ｒ 反应体系中 Ｍｇ２ ＋ 为１５ ｍ ｍ ｏｌ／ Ｌ，ｄ Ｎ Ｔ Ｐｓ 为２００μｍ ｏｌ／ Ｌ，引物为１μｍ ｏｌ／ Ｌ 时可得到较好的结果；在热循环过程中，以５６ ℃退火为宜；扩增反应对模板 Ｄ Ｎ Ａ 质的要求远胜于量。

主 题 词：家蚕 分子标记 选择性扩增 SADF法 

学科分类：090504[090504] 0710[理学-生物科学类] 07[理学] 0905[农学-林学类] 09[农学] 071007[071007] 090501[090501] 

D　O　I：10.3969/j.issn.0257-4799.1999.02.004

馆 藏 号：203995293...