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猪附红细胞体重组酶介导等温扩增技术(RAA)荧光检测方法的建立

猪附红细胞体重组酶介导等温扩增技术(RAA)荧光检测方法的建立

作     者:杜秋明 郑秀红 樊晓旭 赵永刚 乔启波 南文龙 许龙春 吴晓东 DU Qiu-ming;ZHENG Xiu-hong;FAN Xiao-xu;ZHAO Yong-gang;QIAO Qi-bo;NAN Wenlong;XU Long-chun;WU Xiao-dong

作者机构:中国动物卫生与流行病学中心山东青岛266032 延边州动物疫病预防控制中心吉林延吉133000 龙井市德新乡畜牧兽医站吉林龙井133400 

基  金:国家重点研发计划资助项目(2017YFF0208602) 

出 版 物:《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期:2020年第40卷第11期

页      码:2181-2185页

摘      要:为建立一种准确、快速的猪附红细胞体检测方法,根据猪附红细胞体α-烯醇化酶基因保守序列设计特异性引物和探针,经过筛选优化反应条件,建立了重组酶介导的等温扩增(RAA)荧光检测方法。结果显示,建立的方法在39℃恒温条件下20 min内即可特异性地检出猪附红细胞体,与猪肺炎支原体、猪链球菌、猪大肠杆菌、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、非洲猪瘟病毒、健康猪血液无交叉反应,方法的最低检出限为1 copy/μL。用该方法对15份临床样本进行检测,结果阳性率为60%,与荧光定量PCR方法检测结果一致。本研究建立的猪附红细胞体荧光RAA检测方法具有较好的敏感性和特异性,操作简便可应用于猪附红细胞体病的临床快速检测。

主 题 词:猪附红细胞体 重组酶介导等温扩增 α-烯醇化酶基因 

学科分类:090601[090601] 1002[医学-临床医学类] 09[农学] 0906[农学-水产类] 100201[100201] 10[医学] 

D O I:10.16303/j.cnki.1005-4545.2020.11.17

馆 藏 号:203995908...

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