禽流感RT-RAA侧向流试纸条可视化检测方法的建立

作     者：王文静 李馨月 张鹏 刘静茹 姚姗姗 王春光 张铁 WANG Wen-jing;LI Xin-yue;ZHANG Peng;LIU Jing-ru;YAO Shan-shan;WANG Chun-guang;ZHANG Tie

作者机构：河北农业大学动物医学院河北保定071000 

基　　金：河北省农业高质量发展关键共性技术攻关专项资助项目(20326621D) 石家庄市科学技术研究与发展计划资助项目(201500412A) 家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金资助项目(BYSWX2020KFKT02) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2020年第40卷第11期

页      码：2159-2163页

摘      要：禽流感(AI)是威胁我国养禽业健康发展的重要疫病,为建立该病高效、便捷的检测方法进行本项研究。本试验根据禽流感病毒(AIV)保守基因(NP)序列设计引物和探针,利用反转录重组聚合酶介导恒温扩增(RT-RAA)技术对NP基因进行快速扩增并形成双标产物,扩增产物通过侧向流试纸条(LFD)进行快速检测,通过对反应时间、温度和引物浓度等条件的优化,建立了1种能够检测禽流感病毒的RT-RAA-LFD检测方法。结果显示,该方法37℃条件下,反应24 min,即可实现NP目的基因片段的有效扩增,且扩增产物可通过侧向流试纸条肉眼观察;特异性良好,与传染性支气管炎病毒(IBV)、传染性喉气管炎病毒(AILV)、新城疫病毒(NDV)无核酸交叉反应;敏感性达到102 copies/μL,是常规PCR的100倍,临床检测符合率为94.8%。该方法具有特异性强、敏感性高、便捷快速等优点,为田间检测禽流感病毒提供一种可行方法。

主 题 词：禽流感 重组酶介导等温核酸扩增技术 侧向流试纸条 NP基因 

学科分类：090601[090601] 1002[医学-临床医学类] 09[农学] 0906[农学-水产类] 100201[100201] 10[医学] 

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2020.11.13

馆 藏 号：203995946...