广东省575株肺炎链球菌的毒力因子psaA、ply基因检测分析

作     者：熊平 李柏生 江锦志 彭托华 杨彤 刘美真 柯碧霞 刘闪闪 柯昌文 

作者机构：华南农业大学制药工程系广东广州510640 广东省疾病预防控制中心 广东省应急病原学重点实验室 广东省生物制品和药物研究所 

基　　金：中美新发和再发传染病合作项目 广州市科技计划重点项目(No.11C32100704) 

出 版 物：《中国病原生物学杂志》 (Journal of Pathogen Biology)

年 卷 期：2015年第10卷第8期

页      码：693-698页

摘      要：目的采用PCR检测肺炎链球菌(***)毒力基因psaA和ply,研究分析两个毒力基因的特异性,为***临床诊断提供依据。方法对广东省12家医疗机构诊断为***感染患者的654份标本,经过细菌培养和乳胶凝集试验筛选出575株,以psaA、ply基因核心区域序列设计合成扩增引物,以抽提的***分离株DNA为模板,采用常规聚合酶链反应(PCR)扩增目标基因psaA、ply片段,长度分别为838bp和209bp,调查分析不同来源标本的分离株psaA和ply基因检出率;采用乳胶凝集试验与多重PCR分型,比较两种结果中***菌株psaA和ply检出率差异,以及广东***主要血清型与非主要血清型菌株的psaA和ply检出率情况。结果经乳胶凝集试验鉴定为***的560株菌株中,psaA和ply基因检出率分别为78.21%和83.57%,ply基因检出率高于psaA基因,psaA基因阳性的***菌株,其ply基因均阳性;来源于血液和脑脊液标本的***分离株的psaA和ply基因检出率分别为93.18%和95.45%,脓液标本分离的***菌株psaA和ply基因检出率为100%。在荚膜肿胀反应和多重PCR检测为***可分型血清型菌株中,前者psaA和ply基因阳性率分别为93.90%和98.57%,后者为96.34%和98.31%;而在多重PCR检定为不可分型血清型菌株中,psaA和ply基因检出率分别为47.06%和57.84%,显著低于荚膜肿胀试验的68.59%和74.64%,但ply基因检出率也均比psaA高;可分型血清型中主要血清型菌株的psaA和ply基因检出率高于非主要血清型。结论广东地区***临床分离株中ply基因检出率比psaA高,保守性高,但其他链球菌亦能扩增出ply基因从而出现假阳性,因此,对于***菌株的鉴定,采用PCR同时扩增psaA和ply基因,并结合临床常规实验,鉴定更为可靠。此外,血液和脑脊液psaA和ply基因阳性率高可能与psaA和ply是***入侵血和脑的关键因子有关。

主 题 词：肺炎链球菌 psaA基因 ply基因 PCR 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.13350/j.cjpb.150806

馆 藏 号：203997489...