摘要：目的研究短发夹核糖核酸(shRNA)表达载体对2型单纯疱疹病毒(HSV-2)uL54基因的干扰效应。方法针对HSV-2 uL54基因,构建5个靶向HSV-2 uL54基因的短发夹RNA重组表达载体(shRNA1081、shRNA1092、shRNA1276、shRNA1407、shRNA1508),同时设计不针对任何基因的序列为阴性对照组(阴性对照组)及不加任何重组表达载体的空白对照(空白对照组)。重组表达载体通过脂质体转染人胚胎肾细胞(HEK293)后接种HSV-2,48 h后利用荧光定量RT-PCR检测各组细胞uL54 mRNA的表达水平,终点滴定法测定HSV-2子代病毒滴度。结果荧光定量RT-PCR结果示,与空白对照组相比,shRNA1081、shRNA1407和shRNA1508能够降低HSV-2 uL54 mRNA的表达水平(P均<0.01);对uL54基因的抑制率在阴性对照组(加shRNA NC)、shRNA1081组、shRNA1407组、shRNA1508组分别为7%、69%、56%及55%,以shRNA1081组为最高。终点滴定法结果示,与空白对照组比较,shRNA 1081组、shRNA 1407组、shRNA 1508组病毒滴度不同程度下降(P均<0.01)。结论成功构建uL54 shRNA重组表达载体,shRNA1081、shRNA1407、shRNA1508能在体外细胞水平上不同程度地干扰HSV-2 uL54基因表达,从而抑制HSV-2在HEK293细胞中的复制。

摘要：目的：探讨铜绿假单胞菌甘露糖敏感血凝素（ PA-MSHA ）对脓毒症致急性肺损伤炎症反应的影响及可能机制。方法：健康SD大鼠120只按随机数字法分为假手术对照组（SC组，n＝30）、脓毒症组（CLP组，n＝30）、术前治疗组（PreT组，n＝30）和术后治疗组（PosT组，n＝30）。以盲肠结扎穿孔法（CLP）复制大鼠脓毒症模型。制模后12、24、36 h分别采集外周血测定血清细胞因子（TNF-α、IL-6、IL-10和TGF-β）并处死动物，实时RT-PCR方法检测各组肺组织Toll样受体4（TLR4）mRNA表达；计算肺损伤病理评分；采用流式细胞术检测大鼠外周血单核细胞TLR4阳性率。结果：脓毒症大鼠中PreT组与CLP组和PosT组相比，PreT组血清细胞因子TNF-α、IL-6浓度降低而细胞因子IL1-0、TGF-β浓度均高于CLP组和PosT组（ P＜0．01）。脓毒症大鼠中PreT组外周血单核细胞TLR4阳性率和肺组织TLR4 mRNA表达水平低于CLP组和PosT组（P＜0．05），肺组织病理学评分也优于另两组（P＜0．01）。结论：术前给予PA-MSHA 可以明显下调脓毒症大鼠的炎症反应，从而减轻肺病理损伤程度。

摘要：研究了纤维素酶辅助提取银杏叶总黄酮工艺条件。对银杏叶粒径、纤维素酶用量、酶解时间进行单因素考察,根据单因素考察结果设计正交试验,以总黄酮得率为指标确定适宜的正交试验参数:银杏叶细粉100目、纤维素酶用量30 FPIu/g银杏叶、酶解时间50 min,该工艺条件下银杏叶总黄酮提取得率为2.51%,与未添加纤维素酶相比,总黄酮得率增加了54.93%。

摘要：介绍了国内外最新核电发展情况,分析了各类型机组应用现状及发展趋势,概述了MP310、CPR1000、EPR、AP1000等类型核电机组的进化过程及调峰特性,并以法国2座核电站的2台核电机组运行情况为例,结合现役机组实际日运行及月运行数据分析了国外核电机组参与调峰运行情况,最后根据辽宁地区电网电源现状及核电规划,按照负荷预测,通过设计合理的调峰深度,提出应对调峰矛盾的解决方案。

摘要：在电磁散射测量中 ,目标支撑结构的性能非常重要 ,不仅要求其本身的 RCS要小 ,而且支架与目标的相互作用也要小 .根据对一些参考文献的分析 ,提出了一个新的金属支架方案 ,较好地满足散射测量的要求 .并根据等效电流的概念 ,计算出了其 RCS.

摘要：为克隆柔嫩艾美耳球虫裂殖子阶段的功能基因的全长序列,利用SMART技术,采用Clontech公司的Creator TMSMARTTMcDNA Library Construction Kit构建了鸡球虫裂殖子的全长cDNA文库。用试剂盒提取mRNA后,以cDNA合成试剂盒合成cDNA。连接至pDNR-LIB载体,用电转化法将重组质粒转化到*** DH10B内得到原始文库,扩增后保存于-80℃冰箱内;最后以文库为模板,分别以研究室已成功克隆序列(EtSAG2、EtMIC-2、EtMCAT)及Sanger的部分EST序列(Contig1218)设计引物,进行PCR扩增并测序检验文库的实用性。经测定,构建的初级cDNA文库约含有8.72×107个重组子,插入的片段多在1kb～3kb之间,平均插入片段长度约1.8kb,扩增后文库保存的滴度为2.4×104 cfu/mL;通过文库的PCR扩增,不仅可以成功扩增出研究室已成功克隆的序列(EtSAG2、EtMIC-2),并成功获得EtMCAT和EST序列(Contig1218)的全长cDNA序列,经比对分析Contig1218所编码的蛋白为组织蛋白酶B样半胱氨酸蛋白酶(Cathepsin B)。结果表明,已成功构建了柔嫩艾美耳球虫裂殖子高质量的全长cDNA文库,从而为筛选鸡球虫的功能基因全长序列奠定了基础。

摘要：在P4 5 0cam突变体蛋白纯化过程中使用 2 80nm/ 392nm双波长比值检测蛋白质纯度 ,采用 β 巯基乙醇对蛋白质进行还原性保护 ,有效地缩短了纯化进程 ,纯化效率相应提高 .以PEG 80 0 0为沉淀剂经悬滴汽相扩散法筛选得到适合衍射的P4 5 0cam四突变体 (F87L/Y96F/L2 4 4A/V2 4 7A)晶体 ,在Mar Research面探测器系统上收集了0 2 2nm分辨率的X射线衍射数据 .采用同晶差值傅立叶法解析结构 ,最后的晶体学R因子和Rfree分别为 0 197和 0 2 4 7,键长偏差为 0 0 0 177nm ,键角偏差为 1 96°.结构测定显示P4 5 0cam四突变体 (F87L/Y96F/L2 4 4A/V2 4 7A)和P4 5 0cam野生型的整体构象无重大变化 ,突变后活性口袋变大而疏水性增加 ,这与突变设计预期目标一致 .

摘要：H7亚型禽流感病毒致病性强、危害性大,是进出口家禽及禽类产品的主要检疫对象。为了加强对H7亚型禽流感病毒的检测,建立新的快速检测方法。通过对GenBank已报道的H7亚型禽流感病毒的HA基因进行序列分析比较,设计了两套分别针对H7N2亚型和H7Nx亚型的特异性引物和用FAM标记的Taq Man MGB核酸探针,建立了H7亚型禽流感病毒实时荧光定量RT-PCR方法(Real-time RT-PCR)。该方法特异性好,不存在假阴性和假阳性的现象;敏感性高,对禽流感病毒H7亚型标准HI抗原检测的敏感性达到10-5,能够满足口岸禽流感病毒快速、准确、有效的检疫需求。

摘要：BA无标度网络模型可对自然界和人类社会中大多数的网络演化特征进行描述。然而目前还没有一种可以描述BA无标度网络增长特性和优先连接特性的演化模拟软件。针对软件的缺失,设计了基于Lab VIEW与Matlab的BA无标度网络演化模拟软件。利用Lab VIEW构建人机界面和实现动态演化,并以Matlab计算邻接矩阵、节点度和连接概率等数据。最终实现每点击一次增长按钮,就会增加一个节点的BA无标度网络演化的动态显示。该软件有利于学习和理解BA无标度网络模型。通过BA无标度网络演化示例进行结果验证表明,软件不仅能够演示网络演化过程,还可动态计算邻接矩阵、节点度和连边概率。

摘要：目的1设计合成新型四氢异喹啉类化合物，寻找具有抗真菌和抗生育双重作用的化合物，为研究具有抗真菌作用的避孕药物提供先导结构。方法：以3，4-二甲氧基苯乙胺为原料，经Pictet—Spengler反应、碱中和、取代反应、HBr裂解反应制得目标化合物并进行体外抑菌实验和杀精实验。结果：共合成14个目标化合物，它们是2-正辛烷基-6，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氢异喹啉盐酸盐（1）、2-正壬烷基-6，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氢异喹啉盐酸盐（2）、2-正癸烷基-6，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氢异喹啉盐酸盐（3）、2-正十二烷基-6，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氢异喹啉盐酸盐（4）、2-正十二烷基-6，7-二乙酰氧基-1，2，3，4-四氢异喹啉盐酸盐（5）、2-正戊烷基-6，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氢异喹啉氢溴酸盐（6）、2-正己烷基-6，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氢异喹啉氢溴酸盐（7）、2-正庚烷基-6，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氢异喹啉氢溴酸盐（8）、2-正辛烷基-6，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氢异喹啉氢溴酸盐（9）、2-正壬烷基-6，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氢异喹啉氢溴酸盐（10）、2-正癸烷基-6，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氢异喹啉氢溴酸盐（11）、2-正十二烷基-6，7-二羟基-1，2，3，4-四氢异喹啉氢溴酸盐（12）、2-正十四烷基-6，7-二羟基-1，2，3，4-四氢异喹啉氢溴酸盐（13）、2-十六烷基-6，7-二羟基-1，2，3，4-四氢异喹啉氢溴酸盐（14），其中化合物5～14均未见文献报道。实验结果显示，所有目标化合物均有抗真菌活性，6个目标化合物具有抗真菌和抗生育双重作用，其中化合物11、12的活性最强。结论：发现一类具有抗真菌和抗生育双重作用的新型四氢异喹啉类化合物，为研究开发具有抗真菌活性的避孕药提供了先导结构。