摘要：目的研究小干扰RNA（siRNA）干扰Notch2对HepG2细胞增殖的影响。方法用siRNA干扰HepG2细胞中Notch2基因，用RT-PCR检测siRNA干扰后Notch2mRNA与下游靶基因HeslmRNA的表达水平，用Westernblot方法检测Notch2蛋白的改变情况，然后用CCK8法测定HepG2细胞增殖情况，用析因设计的方差分析和组间t检验进行统计学比较。结果肝细胞癌HepG2细胞中Notch2mRNA高表达，Notch2-siRNA干扰抑制后，HepG2细胞的Notch2mRNA和蛋白水平下调，下游Hesl的mRNA表达水平降低。HepG2细胞在Notch2-s识NA处理组12、24、48、72h和96h的增殖抑制率分别为2．640／0±16．20％、38．340／0±8．8%、70．05％±7．80％、70．78％±10．00％和74．22％±4．80％，对照组siRNA处理的细胞增殖抑制率分别为-0．21％±3．65％、11．61％±10．66％、22．11％±7．93％、7．64％±10．00％和4．18％±7．64％，两组比较，F=5．48，P〈0．01，差异有统计学意义。与对照组相比，24h后增殖差异均有统计学意义（t值分别为3．405、7．473、7．749和13．460，P值均〈0．05）。结论Notch2在体外培养的肝细胞癌HepG2细胞中高表达，下调Notch2可以减缓HepG2细胞的增殖，为Notch2的靶向干预作为肝细胞癌的治疗提供了有价值的实验依据。

摘要：目的:基于几种既往研究被证实有良好抗脂肪肝作用的中药有效组分,探求具有防治非酒精性脂肪肝作用的由中药有效组分组成的复方。方法:采用高脂饮食(10%猪油+2%胆固醇+88%基础饲料)诱导的大鼠NAFLD模型(10周),以红景天苷,绞股蓝总苷,姜黄素,山楂总黄酮,白术多糖为研究对象,运用均匀设计法"5因素10水平设计表"分组设计;以大鼠肝组织甘油三酯(TG)为筛选指标,并经多元回归分析获得"最佳配方"。以最佳配方为观察对象,以多烯磷脂酰胆碱胶囊为对照,采用上述动物模型,通过观察肝组织TG含量和血清ALT活性的变化,对所得配方的治疗效果进行验证实验。结果:最佳有效组分配方为红景天苷5.77 mg/kg+绞股蓝总苷17.68 mg/kg+姜黄素4.35 mg/kg+白术多糖69.75 mg/kg,验证实验显示该配方疗效显著,优于多烯磷脂酰胆碱胶囊(P<0.05)。结论:1由红景天苷、绞股蓝总苷、姜黄素、白术多糖特定比例组成的有效组分复方具有较好的防治实验性脂肪肝的效应;2均匀设计在中药有效组分配伍研究中有重要应用价值和意义。

摘要：目的:设计和构建乙型肝炎病毒(HBV)X基因(HBx)特异性的小干扰RNA(siRNA)体内表达载体,筛选抑制X基因表达的有效siRNA,并初步探讨其对HBV复制功能的影响。方法:以X基因为目的基因,以产生siRNA质粒载体pSilencerTM-U6为表达模板,细胞内转录合成3条siRNA,并构建携带荧光素酶报告基因的重组质粒载体plucF-HBx。将重组质粒载体plucF-HBx与产生siRNA的质粒pSilencerTM-U6共转染HepG2细胞,检测荧光素酶活性以筛选出抑制荧光素酶表达的有效siRNA,逆转录聚合酶链反应检测HBx mRNA的表达,进一步证实siRNA对HBx表达的抑制效果,然后将siRNA转染HepG2.2.15,酶联免疫吸附法和荧光定量PCR检测siRNA对HBV复制的影响。结果:合成的3条siRNA中有1条抑制荧光素酶表达,抑制效率为76.3%,并能特异性抑制HBV的复制。结论:成功构建并筛选到针对X基因表达的有效siRNA质粒,为HBV的基因治疗奠定基础。