摘要：目的探讨免疫分子B7-H3对OA成纤维样滑膜细胞(FLS)生物学功能的影响。方法获取OA膝关节滑膜组织5例和正常膝关节滑膜组织4例,并分离、培养原代细胞株。以OA滑膜组织和原代OA-FLS为研究对象,利用免疫组织化学染色、realtime-PCR、流式细胞术研究OA滑膜组织B7-H3表达情况。根据B7-H3996及1041位点设计相应siRNA沉默并下调OA-FLS中B7-H3的表达,通过蛋白质印迹法、流式细胞术测定靶细胞B7-H3蛋白抑制情况,划痕实验、Transwell实验分析其迁移、侵袭能力,CCK-8法检测细胞增殖能力,CBA法检测细胞培养上清细胞因子及趋化因子表达。使用GraphPad Prism 8.0软件分析实验数据,正态分布数据用±s表示,数据间两两比较采用t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果B7-H3分子在OA膝关节滑膜组织中FLS异常高表达。相比于siNC,si996、si1041可以抑制OA-FLS中B7-H3的表达。在Transwell迁移实验中,OA-FLS迁移能力下降[siNC组和si996组(100.3±3.7)个/视野和(48.7±1.2)个/视野,t=13.24,P<0.001;siNC组和si1041组(100.3±3.7)个/视野和(59.7±1.9)个/视野,t=9.80,P<0.001]。在Transwell侵袭实验中,表明侵袭能力下降[siNC组和si996组(127.3±5.6)个/视野和(39.7±3.3)个/视野,t=13.49,P<0.001;siNC组和si1041组(127.3±5.6)个/视野和(57.3±1.9)个/视野,t=11.85,P<0.001]。沉默B7-H3基因可以抑制OA-FLS细胞因子IL-6[siNC组和si996组(248±21)pg/ml和(111±12)pg/ml,t=24.08,P=0.002;siNC组和si1041组(248±21)pg/ml和(46±5)pg/ml,t=13.21,P=0.006]、IL-8[siNC组和si996组(118.1±15.6)pg/ml和(47.1±5.4)pg/ml,t=6.68,P=0.022;siNC组和si1041组(118.1±15.6)pg/ml和(10.0±1.3)pg/ml,t=13.08,P=0.006]和趋化因子CXCL8[siNC组和si996组(178.8±6.4)ng/ml和(83.2±2.7)ng/ml,t=13.77,P=0.005;siNC组和si1041组(178.8±6.4)ng/ml和(93.5±2.8)ng/ml,t=12.23,P=0.007],CCL2[siNC组和si996组(184.1±5.1)ng/ml和(109.4±5.9)ng/ml,t=9.57,P=0.011;siNC组和si1041组(184.1±5.1)ng/ml和(97.1±1.5)ng/ml,t=16.39,P=0.004]的分泌。结论B7-H3可能对OA-FLS的迁移、侵袭及细胞因子分泌等生物学功能有一定的调控作用,为进一步研究B7-H3参与OA发病机制提供了线索。

摘要：基于静载荷试验的数据,针对规范中对水泥土搅拌法桩侧阻力取值过宽的缺陷,进行了地区性的修正,对应于不同的桩长,按频数统计出具体的、幅度较小的取值范围,以满足设计和工程技术人员在实际应用中的可操作性.