摘要：学生是教学的主体,在课堂教学中要提高学生的主体意识,就要以学生的探究为主.教师以问题为导向的任务驱动式教学,拓展学生参与学习的宽度和广度,鼓励学生参与学习,提高自我认识,透析问题本质,落实核心素养.

摘要：目的:调查南京市非公立三级综合医院近十年科研现状,分析存在的问题,并提出相应的对策。方法:发放自主设计的调查表对三家非公立三级综合医院开展科研现状调查,包括课题立项、论文发表和科研成果情况,进行统计分析。结果:三家医院的科研项目立项数量呈波动上升趋势,且在近五年有快速发展,尤其是国家级课题陆续都有突破。但课题仍以省级以下为主,共计491项,占总量的93%。科研论文中SCI虽有不断提升,但数量较公立医院相差很大。结论:非公立医院整体科研水平薄弱、科研能力不足。建议非公立医院需要健全科研管理制度,完善科研激励机制;增加科研投入,完善平台建设;强化人才培养,组建创新人才队伍,不断促进科研水平的提升。

摘要：应用响应曲面试验设计法研究了气相色谱不同的进样方式,包括常规分流不分流进样以及柱头进样对克百威色谱行为的影响。通过构建模型,对试验的影响因子包括进样口温度、初始柱温和载气流速对克百威色谱行为的相对重要性进行了评价。并利用面积归一化方法,对进样口温度和初始柱温对克百威分解的影响进行了定量评价和探讨。结果表明:在常规进样方式中,进样口温度和初始柱温是影响克百威分解的主要因素。通过色谱条件的优化,解决了常规进样不能解决的克百威的热分解问题。

摘要：0引言结核杆菌感染仍是当今世界范围内危害人类健康的严重问题，在发展中国家结核病为一种常见的传染性疾病. 目前，结核病的确诊手段主要依据实验室方法进行，其方法有直接涂片染色抗酸杆菌与结核菌的培养与鉴定，但直接涂片染色阳性率低，且不易于确诊，培养法时间长，达不到快速诊断的目的. 聚合酶链反应(PCR)技术，作为结核菌的非培养诊断技术，其特异性，敏感性，以及简便快速等优点在临床结核病的快速诊断上得到应用. 但是由于受多种因素的影响，使检测结果易出现假阳性及假阴性，给临床确诊带来困难. 我们通过设计一对结核菌特异性引物及特异性探针，采用微孔板反向杂交法，对PCR扩增产物进行液相杂交分析，以进一步提高检测结果的特异性和敏感性.

摘要：目的探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术在肺炎衣原体检测中的应用。方法参照Ｃａｍｐｂｅｌ报道的肺炎衣原体全基因序列、Ｇ＋Ｃ比例和次级结构设计一对引物，采用ＰＣＲ法检测肺炎衣原体ＤＮＡ及临床标本中的肺炎衣原体感染。结果经对肺炎衣原体、沙眼衣原体、大肠埃希菌、溶血性链球菌、白色念珠菌和结核分枝杆菌培养物进行ＰＣＲ扩增，结果只有肺炎衣原体出现单一４３７ｂｐ的扩增区带；敏感性试验可检测出１０ｆｇ的肺炎衣原体ＤＮＡ；１０份模拟标本均扩增出４３７ｂｐ区带；２２份小儿肺部感染的咽拭子标本中有５份为阳性，阳性率为２２．７％，而显微镜检查只有２例可见包涵体；１２份正常小儿咽拭子标本均为阴性。结论ＰＣＲ法检测肺炎衣原体，具有特异、敏感、快速、准确的特点。

摘要：聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)又称体外 DNA 扩增技术或体外核酸克隆技术,自1985年初 Saiki 建立以来,在短短的几年内获得了很大发展。Hance 最先把 PCR 技术应用到结核杆菌的诊断后,国内外相继研究应用。参考国外文献,我们设计合成了一对引物。特异性地扩增结核菌 B

摘要：目的　建立聚合酶链反应快速检测加德纳菌方法 ,用于细菌性阴道病的诊断和治疗 .方法　根据加德纳菌基因序列中 IIS- 2 3sr RNA基因区设计并合成特异性引物 ,应用聚合酶链反应扩增阴道或宫颈分泌物中的加德纳菌 ,并与革兰染色和分离培养进行对照检测 .结果　经对阴道加德纳菌和 5种常见的阴道感染病原体检测 ,证实所用引物具有较高的特异性 ;敏感性实验结果 10 2 可扩增出明显的区带 ;在 5 0例宫颈分泌物标本中 ,革兰染色阳性检出率为 18% (9/ 5 0 )、分离培养阳性检出率为 16 % (8/ 5 0 ) ,聚合酶链反应阳性率为 2 8% (14/5 0 ) .结论　采用聚合酶链反应检测阴道分泌物中的加德纳菌 ,用于细菌性阴道病的快速诊断 。

摘要：目的　探讨聚合酶链反应快速检出血培养物中的伤寒杆菌 ,用于伤寒杆菌菌血症的诊断 .方法　根据伤寒杆菌鞭毛抗原基因 DNA核苷酸序列设计特异性寡核苷酸引物 ,应用聚合酶链反应技术快速检出血培养物中的伤寒杆菌 .结果　对伤寒杆菌和 7株非伤寒杆菌 ,同时进行 PCR扩增 ,结果只有伤寒杆菌出现 45 8bp的特异性扩增区带 ,其他 7株非伤寒杆菌均未出现 45 8bp的扩增区带 .有关引物的敏感性 ,经对倍比稀释的伤寒杆菌菌悬液进行扩增 ,结果表明 ,在 10 0个菌细胞时即可扩增出明显的 45 8bp的区带 .应用所建立的 PCR方法 ,对 10份模拟血培养中的伤寒杆菌进行检测 ,已确定PCR鉴定伤寒杆菌的最佳鉴定时机 ,在第 6小时检测出的阳性结果可达 80 % ,8h以后的阳性结果就可达 10 0 % ;对 18例发热患者血液用常规细菌增菌培养、分离鉴定与 PCR法同时检测 ,结果分离鉴定法有 5例被证实为伤寒杆菌感染 ;有 6例被 PCR扩增出特异性区带 ,在检出时间上 PCR法 (8h)明显早于细菌分离鉴定法 (48h) .结论　以伤寒杆菌鞭毛抗原基因 DNA核苷酸序列设计特异性寡核苷酸引物 ,用于血培养物中伤寒杆菌的快速检出 。

摘要：目的　建立脑膜炎多重 PCR检测系统 ,以在一次扩增中快速、特异地同时检出新型隐球菌、结核杆菌、脑膜炎双球菌 ,用于脑膜炎病原体感染的快速诊断 .方法　根据新型隐球菌 URA保守序列、脑膜炎双球菌基因组中特定的 H.8外膜蛋白基因序列、结核分枝杆菌基因组中的 IS986插入基因序列片段 ,分别设计出 3对特异性寡聚核苷酸引物 ,采用多重PCR技术 ,同时检出脑脊液中的新型隐球菌、结核杆菌、脑膜炎双球菌 .结果　应用多重 PCR反应体系 ,对引物的相关性实验结果表明引物之间不会因相互干扰而出现假阳性结果 ;多重 PCR扩增的预期结果为 :单一菌感染出现一条特异性扩增区带 ;混合感染应出现 2条或 3条特异性扩增区带 ,经实验达到预期的扩增结果 ;对 15份已明确诊断的脑脊液标本 ,分别采用常规 PCR和多重 PCR进行同步扩增 ,结果两种扩增方法均能扩增出预期的目的片段 ,符合率达 10 0 % .对 2 0例临床脑脊液标本的 PCR扩增结果分别为 :新型隐球菌 15 % (3/2 0 )、结核杆菌 2 5 % (5 / 2 0 )、脑膜炎双球菌 10 % (2 / 2 0 ) .结论　多重 PCR有效地为临床病原体的混合感染 ,以及原因不明的脑膜炎患者的快速诊断 ,提供了快速、准确的诊断手段 .有效地减少了脑膜炎的误诊和漏诊 。