摘要：目的建立基于SYBR Green和Taqman探针的2种实时荧光定量PCR(qPCR)方法,用于检测人单纯疱疹病毒(HSV)并评估2种方法检测血浆中HSV的有效性。方法根据GenBank中HSV的UL30基因保守序列设计引物和探针,并构建含有UL30基因保守序列的重组质粒,以该重组质粒为标准品,通过对144(人)份献浆者HSV的检测,建立并评估基于SYBR Green和Taqman探针的2种qPCR检测方法。结果所建立的2种qPCR方法对于HSV均具有高度特异性,对HBV和梅毒无交叉反应;检测灵敏度高,检测下限均为5×101cp/反应体系,并都有较好的批间和批内重复性;基于SYBR Green的qPCR检测方法得到的熔解曲线峰单一。应用该2种qPCR方法对献浆人群血浆标本HSV检测:检出率均为2.08%(3/144),二者都能用于HSV载量的测定。结论成功建立了2种qPCR反应体系,二者对HSV的检测特异性强、灵敏度高、均一性好,可应用于献血(浆)者血液检测。

摘要：目的　建立中国人原发无精与少精症Y染色体无精症因子 (AZF)区域微缺失临床基因诊断的方法并进行初步评价。方法　在完成中国人原发无精与少精症Y染色体无精症因子区域微缺失分子流行病学研究的基础上 ,采用盲法和多重聚合酶链反应 琼脂糖电泳检测技术 ,利用挑选的AZFa、AZFb、AZFc 3个区域共 8个序列标签位点 (STS) ,对 10 0例原发无精与 80例少精症患者的精液进行微缺失分析。两组患者中各有 2 7例和 16例在事先分子流行病的研究中已确认存在AZF微缺失。结果　在原发无精症患者中检出STS位点缺失 2 7例 ,原发少精患者中检出AZF区STS位点缺失 16例 ,所有试验前被确认的AZF微缺失均被检出 ,未发现假阳性与假阴性结果 ,检测的灵敏度与特异性均为 10 0 %。结论　本研究所确定的AZF区域 8个STS位点缺失与中国人原发无精和严重少精密切相关 ,利用上述STS位点与试验设计的多重聚合酶链反应技术进行微缺失分析 ,可以准确、方便、快速地完成中国人原发无精与少精症AZF区域微缺失的基因诊断 。

摘要：目的了解成渝地区HPV16亚型基因的一级结构特点,为成渝地区宫颈癌的防治及HPV疫苗的研制提供理论基础。方法收集宫颈癌组织标本,针对HPV16亚型分别设计L1、E6和E7基因特异性引物,用PCR方法从宫颈癌组织中获得各基因的全长序列,并构建克隆载体pGEM-T,进行序列分析,同时分别以L1、E6和E7基因序列进行进化分析。结果在102例宫颈癌标本中,99例为HPV阳性,感染率为97.1%,其中32例(32.3%)为HPV16单重感染,所占比例最高。通过与标准株比较,发现成渝两地HPV16亚型E6、E7和L1基因都存在一定程度的变异,变异率分别为90.6%、78.1%和25.0%。结论与标准序列比较,成渝地区HPV16亚型L1、E6和E7基因存在一定范围的变异,提示我们,在预防治疗成渝地区妇女宫颈癌病人以及研制开发针对西南地区的宫颈癌疫苗时,需要注意这些位点的变异,特别是一些引起氨基酸变异的位点。

摘要：南阳位于河南省西南部,与湖北省、陕西省接壤,因地处伏牛山以南,汉水之北而得名。因三面环山,南部开口的马蹄形盆地,故称南阳盆地。南阳市是豫西南政治、经济、文化、教育、科技、物流、交通中心,南阳是中原经济区主体区和连南启西的重要支点。南阳历史文化悠久,人杰地灵。南召杏花山猿人遗址及多处原始社会遗址出土的化石、器物表明,远在几十万年前,人类祖先己在这块土地繁衍生息。