摘要：为建立一种牛瑟氏泰勒虫快速检测技术,根据GenBank上已发表的牛瑟氏泰勒虫P23表面蛋白基因序列(D84447)设计1对特异性引物,扩增出大小为244 bp的基因片段,经克隆、测序分析,与已知基因序列同源性为100%。用该对引物建立的牛瑟氏泰勒虫二温式PCR能检测出的最高敏感度为171 fg/μL,与牛新孢子虫、弓形虫和卵形巴贝斯虫不产生交叉反应,对48份临床血液样本进行检测,阳性检出率为66.67%。用同一对引物对28份临床血液样本分别进行二温式PCR和三温式PCR检测,阳性符合率为95%,总符合率为96.43%。结果表明,该方法具有快速、敏感、特异等优点,可用于牛瑟氏泰勒虫病的快速临床诊断及流行病学调查。

摘要：根据猪附红细胞体OxaA膜蛋白基因设计了1对分别标记生物素和地高辛的引物,将PCR扩增产物固定至链霉亲和素包被的酶标板中进行酶联显色检测,并优化PCR扩增及ELISA检测步骤,建立了猪附红细胞体PCR-ELISA。结果显示,该方法较传统的PCR-ELISA节约近2h,最低能检出0.36pg的猪附红细胞体DNA,敏感性比常规PCR高10倍,且与猪链球菌、猪肺炎霉形体、大肠杆菌等无交叉反应。用该方法对64份猪血液中提取的DNA样品进行检测,结果阳性检出率为35.9%,明显高于常规PCR的28.1%。结果表明,建立的猪附红细胞体PCR-ELISA具有敏感、特异、安全和快速的特点。

摘要：为构建牛瑟氏泰勒虫双拷贝p23表面蛋白基因真核表达质粒,根据GenBank牛瑟氏泰勒虫p23表面蛋白基因序列(D84447),分别设计2对特异性引物,利用全血基因组DNA提取试剂盒提取牛瑟氏泰勒虫基因组DNA,采用SOE-PCR技术构建双拷贝p23基因,克隆到pMD-18一T载体上,经过PCR、酶切鉴定及测序后,亚克隆到pVAX-I真核表达载体上,经过鉴定后采用脂质体法将重组质粒pVA XI-2p23转染到BHK-21细胞,用IFA和RT-PCR来鉴定目的基因的表达情况.结果表明,成功构建了牛瑟氏泰勒虫双拷贝p23表面蛋白基因真核表达质粒,并在BHK-21细胞中获得表达.

摘要：含磺酰基药物在临床治疗药物中占有相当比重,将磺酰基引入到小分子中是药物分子结构改造的重要策略之一,综述了磺酰基在药物分子设计中的应用.就结构而言,磺酰基和羰基、羧基、四氮唑、磷酸基具有相似的大小和电荷分布,可以作为它们的生物电子等排体而引入到小分子中,从而保持或增强小分子的生物活性;磺酰基具有独特的物理化学性质,磺酰基的引入可以调节小分子的溶解性和酸碱性;磺酰基能提供两个氢键受体,合理的引入磺酰基可以通过增加小分子和作用靶标的氢键相互作用而提高化合物的生物活性;磺酰基结构较稳定,引入磺酰基可以通过阻断易代谢位点而提高药物代谢稳定性,延长其作用时间,提高其生物利用度,从而改善小分子的药代动力学性质;磺酰基属于极性基团,磺酰基的引入还可以增加小分子的极性从而降低h ERG毒性.

摘要：设施土壤往往同时存在次生盐渍化、养分失衡等多种障碍问题,单一改良措施难以有效促进作物生长。根据土壤障碍类型,设计多用途改良剂,同步消减土壤多种障碍,有利于大幅增产提质。为了验证改良剂的应用效果及推荐用量的可靠性,在推荐用量的基础上,设置施用推荐用量的25%、50%、100%、125%和150%进行校验,观测作物生长及产量情况,采样测定土壤基本理化性状。结果表明,①在重度、中度和轻度盐渍化土壤上,适量施用土壤改良剂能提高萝卜和紫甘蓝产量,在重度盐渍化土壤上施用改良剂的增产效果大于在中度和轻度盐渍化土壤上的增产效果,随着改良剂用量的增加,萝卜肉质块根和紫甘蓝叶球中硝酸盐含量不断下降;②在中度盐渍化和养分失衡障碍土壤上施用土壤改良剂,随着土壤改良剂用量的增加,土壤容重有效降低,土壤孔隙度尤其是土壤通气孔隙度增加,土壤水稳性大团聚体含量增加;③施用土壤改良剂能有效遏制土壤酸化(推荐用量下,改良剂使土壤pH值提高0.71个单位),随着改良剂用量的增加,土壤有机质含量不断增加,土壤中过多的速效氮消减效果明显,同时土壤电导率、水溶性钙离子和硫酸根离子浓度呈下降趋势。