摘要：核因子E2相关因子2(nuclear factorerythroid-derived factor 2-related factor,NRF2),是一个重要核转录因子,参与多种生物活动,是机体抗氧化应激的核心分子,是超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)等抗氧化酶基因的上游,起到感应器的作用。在活性氧(reactive oxygen species,ROS)或自由电子刺激下,NRF2入核后与抗氧化反应元件(antioxidant response element,ARE)结合,可促进激活下游多个抗氧化、抗炎蛋白及解毒酶等靶基因的表达。肺部结构复杂,发病机制错综复杂,近来科学研究发现,除免疫反应外,氧化-抗氧化失衡也是关键的发病机制。本文就NRF2的特征、调控、功能及其与肺纤维化、支气管哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺肿瘤等肺部疾病的关系做一综述。

摘要：目的通过体外构建携带抗氧化基因核因子E2相关因子2（Nrf2）的骨髓间充质干细胞（BMSC），观察Nrf2对百草枯所致肺损伤模型小鼠的保护作用。方法构建携带有Nrf2基因的过表达慢病毒并转染BMSCs，建立携带有抗氧化基因Nrf2的BMSCs体系。将120只清洁级Balb／c小鼠按随机数字表法分为正常对照组、P0染毒模型组、BMSCs治疗组、携带空载基因的BMSCs治疗组（BMSC—Cherry治疗组）、携带Nrf2基因的BMSCs治疗组（BMSC—Nrf2治疗组）5组，每组24只。腹腔注射PQ溶液25mg／kg复制小鼠PQ中毒肺损伤模型，正常对照组给予等体积生理盐水；BMSC治疗组、BMSC—Cherry治疗组、BMSC—Nrf2治疗组于制模后6h经球后注射相应的BMSCs0．3mL，每只1×106个。制模后处死小鼠取肺组织，用蛋白质免疫印迹试验（WesternBlot）检测肺组织Nrf2蛋白表达；留取血液标本，用化学比色法检测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）等氧化应激指标，用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等炎症指标，用原位末端缺刻标记试验（TUNEL）检测肺组织细胞凋亡情况。结果与正常对照组比较，制模后3d和21d，PQ染毒模型组、BMSC治疗组、BMSC—Cherry治疗组、BMSC—Nrf2治疗组的Nrf2蛋白表达均显著升高，且以BMSC—Nff2组21d升高最明显（灰度值：3．52±0．26比1．00±0．12，P〈0．05）。PQ染毒模型组血清MDA、IL-1β、TNF-α水平均较正常对照组明显升高，SOD、GSH均较正常对照组明显降低；用BMSC、BMSC—Cherry、BMSC—Nrf2干预后，随着时间延长，各组MDA、IL-1β和TNF-α水平均较PQ染毒模型组逐渐降低，SOD、GSH均较P0染毒模型组逐渐升高，以BMSC—Nrf2组制模后21d变化最显著（MDA（umol／L）：2．09±0．28比3．11±0．11，SOD（kU／L）：23．88±0．68比16．12±0．87，GSH（ixm01]L）：2．92±0．21比2．33±0．15，IL-1β（ng／L）：55．58±4．54比87．23±9．28，TNF-α（ng／L）：179．25±9．40比228．38±13．30，均P〈0．05J。与正常对照组比较，PQ染毒模型组TUNEL染色阳性细胞明显增多[（45．06±6．78）％比（3．11±0．99）％]；与PQ染毒模型组比较，BMSC治疗组、BMSC-Cherry治疗组、BMSC—Nrf2治疗组阳性细胞明显减少【（30．34±1．79）％、（26．25±4．97）％、（18．00±3．15）％比（45．06±6．78）％]，且以BMSC—Nrf2治疗组下降最明显（P〈0．05）。结论BMSCs及携带有抗氧化基因Nrf2的BMSCs均能有效减轻PQ所致肺损伤，且以BMSCs—Nrf2的作用更显著；其保护作用可能与拮抗体内氧化应激和炎症因子等有关。

摘要：目的通过构建百草枯（paraquat，PQ）所致的小鼠肺损伤模型，研究携带抗氧化基因超氧化物歧化酶（supemxide dismutase，s0D）的骨髓间充质干细胞对其的治疗作用及可能机制。方法构建携带有SOD基因的过表达慢病毒并转染骨髓问充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells，BMscs），建立携带有抗氧化基因SOD的BMSCs体系。将100只清洁级Balb／c小鼠按照随机数字表分为对照组、PQ染毒组、BMscs治疗组、携带空载基因的BMscs治疗组（BMsc．空载体治疗组）、携带s0D基因的BMscs治疗组（BMSC-SOD治疗组）。每组20只。PQ染毒组和各治疗组腹腔注射质量分数为20％PQ溶液（25mg/kg）构建小鼠PQ中毒肺损伤模型，对照组给予等体积生理盐水；在注射PQ溶液后4h给予相应组别球后静脉注射相应的骨髓间充质干细胞体系，分别在给予细胞治疗后的3、7、14、21d处死各组小鼠取相应肺组织标本，HE染色，观察肺组织损伤情况，观察肺组织超显微结构损伤情况。留取血液标本，用化学比色法检测SOD、丙二醛（methane dicarhoxvlic aldehyde，MDA）、谷胱甘肽（glutathione，GSH）等氧化应激指标；用ELISA方法检测肿瘤坏死因子（tumor necmsis factor，TNF）-α、转化生长因子（transfornling growth factor，TGF）-β等炎症指标，用蛋白免疫印迹法（westem Blot）检测肺组织SOD的表达情况。结果与对照组比较，第3天PQ染毒组SOD蛋白表达明显降低，第21天PQ染毒组s0D蛋白表达升高；与PQ染毒组比较，第3、21天BMSCs治疗组、BMSC-空载体治疗组、BMSc-S0D治疗组SOD蛋白表达明显升高，且BMSC-s0D治疗组升高最明显，差异均有统计学意义（P〈0．05）。与对照组比较，第3、7、14、21天PQ染毒组及BMSCs治疗组、BMSC-空载体治疗组、BMSC-S0D治疗组GsH含量和S0D活力均明显降低，且均明显高于PQ染毒组，以BMSC-s0D治疗组升高最为明显，差异均有统计学意义（P〈0．05）；与对照组比较，第3、7、14、21天PQ染毒组及BMSCs治疗组、BMSC-空载体治疗组、BMSC-S0D治疗组MDA水平明显升高，第3、7、14、21天各治疗组均明显低于PQ染毒组，以BMSC-s0D治疗组下降最明显，差异均有统计学意义（P〈0．05）。与对照组比较，第3、7、14、21天PQ染毒组及各治疗组TNF-α及TGF-β含量明显升高，第3、7、14、21天各治疗组明显低于PQ染毒组，以BMSC-S0D治疗组下降最明显，差异均有统计学意义（P〈0．05）。肺组织切片显示，第3、7、14、21天PQ染毒组与各治疗组肺组织明显损伤；第3、7、14、21天Vs治疗组、BMSC．空载体治疗组、BMSC-S0D治疗组肺组织损伤比PQ染毒组明显减轻；其中以BMSC-S0D治疗组肺组织损伤减轻最明显。PQ染毒组与各治疗组肺组织超微结构明显损伤；BMscs治疗组、BMSC-空载体治疗组、BMSC-S0D治疗组肺组织超微结构损伤比PQ染毒组明显减轻；其中以BMSC-S0D治疗组肺组织超微结构损伤减轻最明显。结论SOD是细胞内清除氧自由基的关键因子，其表达上调可明显抑制PQ诱导的氧化应激损害及凋亡，提高肺泡上皮细胞抵抗外界有害环境的能力。

摘要：目的:建立耐百草枯(PQ)的人肺腺癌细胞株(A549/PQ),并初步研究其生物学特性。方法:采用浓度递增诱导法建立A549/PQ,光镜观察细胞形态变化,以乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测法、CCK-8法检测A549/PQ和亲本A549对PQ的敏感性,计算A549/PQ的半数抑制浓度(IC50)和耐药指数(RI),细胞计数法绘制细胞生长曲线和倍增时间,流式细胞技术分析细胞周期。结果:光镜下A549/PQ细胞变大、形态不规则、细胞间隙变大。PQ诱导A549/PQ细胞LDH释放明显低于其亲本细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。PQ诱导A549/PQ细胞IC50为1716.33μmol/L明显高于A549细胞的215.03μmol/L(P<0.05),RI为7.98。A549/PQ细胞倍增时间明显高于A549细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。A549/PQ细胞G0/G1期细胞明显增多,S期细胞明显减少(P<0.05)。结论:成功构建对PQ耐药的A549细胞,其生物学特征与亲本细胞存在明显差异,为PQ毒理机制研究提供了良好细胞模型。