摘要：目的通过添加抗氧化剂促进羊水细胞的培养效果。方法分离传代的成纤维型羊水细胞,以生长指数为检测指标,在H配方的基础上利用部分析因设计法和最陡爬坡法对促进羊水细胞生长的抗氧化剂进行筛选和优化。优化后的培养基通过原代羊水细胞培养进行效果验证。结果添加的维生素E、L-抗坏血酸、α硫辛酸和还原型谷胱甘肽等抗氧化剂皆能促进羊水细胞的生长,且具有协同效应。与H培养基相比,经最陡爬坡法优化的培养基培养的羊水细胞在克隆总数、生长指数等指标都提高3倍以上,分裂相细胞总数增长4倍以上。结论改良后的羊水细胞培养基培养效果要显著优于H配方培养基,在产前诊断应用中具有推广价值。

摘要：目的对染色体分析用人外周血淋巴细胞培养基进行冻干工艺进行优化。方法首先以澄清度和细胞培养分裂相比例为检测指标确定冻干前培养液浓缩倍率。其次运用正交试验设计法L934法,以冻干粉外观、水分残留率、分裂相比例为检测指标,对冻干工艺过程的的预冻、升华干燥、解析干燥等三个阶段的主要参数进行考察和分析,获得主要参数最优组合的冻干曲线。最后,以优化的冻干工艺生产的三批冻干培养基进行适用性验证。结果确定冻干前培养液的浓缩倍率为3.0。正交实验分析表明:主干燥时间和主干燥真空压力对细胞分裂相比例的影响有显著的统计学意义(p<0.05)。优化的冻干参数为预冻温度-45℃、时间2 h;升华干燥阶段温度从-45℃升温至20℃,时间14 h,真空压力35 Pa;解析干燥阶段的温度维持于28℃,真空压力为1.0 Pa,终点测试压力无变化时通入干燥无菌空气至冻干箱内压力为76 kPa后压塞,再通入干燥无菌空气至箱体内压力为1个标准大气压时冻干结束。用优化冻干工艺生产的三批培养基的验证结果显示外观合格率、水分残留率、常温保存180 d后的分裂相比例均符合质量标准要求。结论优化的淋巴细胞培养基冻干工艺可行,可用于制备常温贮存的人外周血淋巴细胞培养基。