摘要：目的:探讨低氧对肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖和凋亡的影响,以及HIF-1α、P-ERK1/2、iN-OS蛋白表达变化在其中的作用与意义。方法:体外培养大鼠PASMC,设计常氧组、低氧组及ADM、L-NAME、PD98059干预组,用MTT比色法和PCNA的免疫组化法测定细胞增殖反应,用流式细胞仪检测细胞凋亡,用West-ern blotting法检测HIF-1α、P-ERK1/2、iNOS的蛋白表达。结果:(1)低氧24h组的A值明显高于常氧组(P0.05)。(4)Western blotting表明常氧组少量HIF-1α、iNOS、P-ERK1/2表达,低氧4h后均表达增高(P<0.01),8h仍维持在高峰(P<0.01),而HIF-1α、P-ERK1/2在低氧24h后表达下调。L-NAME促进了HIF-1α表达(P<0.01),PD98059部分抑制了HIF-1α、iNOS及P-ERK1/2表达(P<0.01);ADM部分抑制了HIF-1α表达,促进iNOS表达(P<0.01)。结论:低氧能促进肺动脉平滑肌细胞增殖,对细胞的凋亡无影响;HIF-1在低氧诱导肺动脉平滑肌细胞增殖中起重要作用。

摘要：目的:优选精制益母草生物碱的提取纯化工艺。方法:采用平行设计法,以总生物碱提取量为判断指标,分别观察超声、回流、浸渍法提取益母草中生物碱的提取率,确定最佳提取工艺;以生物碱含量为判断指标,采用4种不同化学特性的ADS树脂,分别观察其在提取液不同pH环境、不同洗脱条件下,回收生物碱的量和纯度,确定最佳纯化工艺。结果:超声结合不同溶剂提取对精制益母草生物碱提取率的影响不同,以0.05%盐酸乙醇的提取干膏生物碱含量和提取率最高,平均生物碱提取率为0.373%;在回流法中,以0.05%盐酸乙醇的提取干膏生物碱含量和提取率最高,平均生物碱提取率为0.317%;在浸渍法中,以1%盐酸的提取干膏生物碱含量和提取率最高,平均生物碱提取率为0.410%。在纯化工艺方面,在提取液pH为6～8之间时,4种ADS大孔树脂对生物碱均有吸附作用,其中pH为8时ADS-B的静态吸附最强。结论:本研究建立了高效、稳定的精制益母草生物碱的提取和纯化工艺,可为进一步开发新型具有抗心肌缺血或心血管保护作用的新药奠定基础。