摘要：为解决中学语文文言文教学低效的问题，培养学生阅读文言文的能力，提高文言文教学质量，笔者在文言文翻译成白话文的常规教法基础上，研究、实践把白话文翻译成文言文的“对译”创意教法．这一教法大大提高了文言文教学的效率与语文教学质量。

摘要：于漪老师说:'进入语文织就的‘宝藏’,能开阔视野,提升精神,净化感情,增添智慧,认识社会,品尝人生,其中快乐,难以言表.'因而语文教学应该是最有生气最富情趣的艺术活动.然而那种程序式的教学却很难引起学生的多大兴趣,事实上,千差万别的文本个性和学生各不相同的学习个性,也决定着我们必须在教学中寻求新的教学模式,追求个性教学.

摘要：目的 探索TTV DNA在肝组织表达特点。方法 选择TTV DNA高保守区设计一对引物，采用PCR扩增法，以地高辛标记TTV ORF1部分基因序列，合成Gla，G2b两种亚型的双链TTV DNA探针。应用巢氏PCR法筛选出TTV DNA阳性的慢性肝炎、肝硬化、原发性肝癌病人的肝组织标本共60份，同时用两种探针进行原位杂交。结果 TTV DNA主要见于肝细胞、肝癌细胞的细胞核内，极少数肝细胞胞浆内TTV DNA呈弱阳性。TTV DNA阳性细胞在慢性肝炎、肝硬化、肝癌组织中均呈散在分布。肝癌组织与癌周组织中TTV DNA阳性细胞密集程度差别不明显。结论 TTV是一种嗜肝病毒，TTV DNA在被感染肝组织及肝癌的细胞核内表达及复制。

摘要：1997年12月日本学者Nishizawa等最先从一例输血后非甲非庚型肝炎患者血清中分离到一种DNA病毒克隆(N22),命名为TT病毒(transfusion transmitted virus,TTV).并报道感染TTV后表现为一过性或持续性病毒血症,且病毒滴度与ALT升高相关,推测TTV可能是未知病毒致肝损害的病因之一[1].为探讨这一新型病毒在肝组织中的表达与分布特点,我们在TTV ORFl的保守区设计一对引物,采用PCR扩增法,以地高辛标记TTVORFl部分基因序列(1914-2186nt),获得双链TTV DNA探针.用此探针对部分肝病患者肝组织TTV DNA进行原位杂交检测,并对其中一株TTV ORFl部分基因进行分子克隆与核苷酸序列分析,现报道如下.

摘要：目的比较乙型肝炎患者肝细胞癌及其癌旁肝组织中着丝粒蛋白K(CENPK)基因启动子区域甲基化水平的差异,提升肝癌早期诊断和治疗水平。方法从美国国家生物技术信息中心(NCBI)获取并分析CENPK基因的全长基因组序列,采用Primer 5.0软件设计针对CENPK基因启动子区域典型CpG岛的特异性扩增引物;利用亚硫酸氢盐测序聚合酶链反应(bisulfite sequencing PCR,BSP)分析比较4对肝细胞癌及其配对癌旁组织中CENPK基因启动子区域CpG岛的16个CG位点的甲基化情况。结果成功筛选及鉴定4对肝癌和癌旁组织中CENPK基因启动子区域CpG岛甲基化状态,经比较分析测序结果显示,3例乙型肝炎患者肝细胞癌组织中CENPK基因启动子区域CpG岛的甲基化水平显著低于癌旁组织(P<0.05)。结论CENPK基因在肝细胞癌组织中异常高表达与其启动子区域的DNA低甲基化水平密切相关,提示表观遗传学机制在肝细胞癌发生发展中起到重要的作用。

摘要：目的构建大鼠TIMP1 miRNA慢病毒RNAi载体,并观察其转染HSC-T6细胞后对TIMP1基因表达的影响。方法根据BLOCK-iT Poll miR RNAi Expression System with EmGFP要求,应用在线miRNA设计工具http://***/rnaiexpress/,针对大鼠TIMP1基因(GenBank:U06179)的598位点设计、合成Oligo DNA,退火形成双链DNA后,与载体pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR连接,转化Top10感受态细胞,构建TIMP1 miRNA慢病毒RNAi载体。经PCR扩增及测序鉴定正确后,以脂质体LipofectimineTM2000介导转染经TGF-β1刺激的大鼠肝星状细胞株HSC-T6,24、48、72h后收集细胞,应用RT-PCR鉴定TIMP1的表达情况。结果经PCR及测序鉴定构建的TIMP1 miRNA慢病毒RNAi载体正确;将其转染经TGF-β1刺激的大鼠肝星状细胞株HSC-T6,48 h即可见TIMP1 mRNA表达量下降,72 h检测不到TIMP1 mRNA的表达,而未转染组及转染pLacZ-miR/GFP(阴性对照)组未见此改变。结论成功构建大鼠TIMP1 miR-NA慢病毒RNAi载体pTIMP1-miR/GFP;pTIMP1-miR/GFP使大鼠肝星状细胞株HSC-T6 TIMP1基因沉默。提示了RNA干扰可使肝纤维化形成过程中的关键因子TIMP1基因沉默,为RNA干扰技术进一步应用治疗大鼠肝纤维化模型奠定了基础。