摘要：以啤酒酵母为材料,通过单因素试验初步确定氯化钙浓度、海藻酸钠浓度和固定化温度在酵母细胞固定化时的条件,再根据Box-Benhnken的中心组合试验设计,对氯化钙浓度、海藻酸钠浓度和固定化温度进行实验和响应面分析,得出啤酒酵母固定化的最佳条件为:氯化钙浓度2.05mol/L、海藻酸钠浓度2.9%和固定化温度25.3℃,并用在该条件下制备的固定化酵母细胞于28℃发酵12!Be麦芽汁7d,可使发酵液中耗糖率达到75.2%。

摘要：以啤酒废酵母为原料,通过单因素试验从料水比、提取时间、提取温度和醋酸添加量等四个因素中确定了三个主要因素,并根据Box-Benhnken的中心组合实验设计原则,应用响应面法对谷胱甘肽(GSH)提取工艺参数进行了分析,得到了谷胱甘肽提取的最佳工艺条件:在料水比1:4,温度43.6℃的条件下,添加3.5%的醋酸,提取5.5h。此条件下谷胱甘肽的提取得率可达到29%以上。

摘要：以啤酒酵母为材料,通过单因素试验在自溶时间、温度、pH值、助溶剂及外加酶等因素中确定对酵母自溶影响关键的因素,然后根据Box-Benhnken的中心组合试验设计原则,选取对酵母自溶影响较大的3个因素,即自溶温度、pH值和加酶量进行试验和响应面分析,得出啤酒酵母自溶的最佳条件为每100g酵母泥中添加NaCl 3g、β-葡聚糖酶0.3g,控制自溶温度55.7℃、pH5.9,经过18h自溶后,酵母自溶液中氨基酸态氮含量可达0.592g/100mL。

摘要：背景:粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(human granulococyte-macrophage colony stimulating factor,hGM-CSF)是刺激造血前体细胞分化及增殖的细胞因子,同时在机体免疫调节过程中具有重要作用。大肠杆菌表达系统所具有的低成本、高产量等优点则是其他体系无法比拟的,因此仍是目前最常用的外源基因表达系统。目的:观察重组人粒细胞集落刺激因子在大肠杆菌中的表达。设计、时间及地点:观察性实验,于2007-02/06在三峡大学生物技术研究中心实验室完成。材料:质粒pBR322hGM-CSF购自美国ATCC菌种保藏中心。hGM-CSF抗体购自Sigma公司,IPTG、X-gal和载体pMGT-18,购自上海生物工程技术公司。方法:根据hGM-CSF基因序列设计出引物,以克隆载体质粒pBR322-hGM-CSF为模板,得到hGM-CSF基因并重组入原核表达载体pGEX-4T-1中,将经酶切和测序鉴定正确的重组质粒转化大肠杆菌DH5α,用IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE鉴定并用Western bloting检测。主要观察指标:hGM-CSF在大肠杆菌中的表达。结果:SDS-PAGE显示,得到相对分子量为40500的目的蛋白,表达量可达菌体总蛋白的17.9%。Western bloting检测表明,抗hGM-CSF单抗可与相对分子量为40500大小的电泳条带发生特异性反应。结论:实验构建了原核表达载体pGEX-hGM-CSF,并在大肠杆菌中诱导表达,得到hGM-CSF融合蛋白。

摘要：以啤酒酵母为原料,通过单因素试验在自溶时间、温度、pH值及助溶剂等因素中确定对酵母自溶影响最为关键的因素,然后根据Box-Benhnken的中心组合试验设计原则,选取对酵母抽提影响较大的3个因素:自溶时间、自溶温度和pH值进行实验和响应面分析,得出啤酒酵母抽提的最佳工艺条件:在NaCl添加量为3%的条件下,自溶时间18.5h、自溶温度56.8℃和pH6.03,在此条件下酵母抽提液中氨基氮含量可达0.44g/100mL。

摘要：采用抗魔芋(Amorphophallus rivieri Durieu)软腐病的内生芽孢杆菌BS-8发酵液灌根魔芋植株,定期测定该内生拮抗菌在魔芋叶片中的定殖情况。根据该内生菌16S rRNA特异性保守区域设计引物,定期4次采样,提取魔芋叶片DNA,通过SYBR Green I实时荧光定量PCR法检测该内生拮抗菌在魔芋叶片中的定殖情况。结果表明,经内生拮抗菌灌根培养的魔芋叶片中芽孢杆菌数量均明显大于对照,该内生芽孢杆菌能大量定殖在魔芋叶片中。

摘要：以学生感兴趣的酿造产品为对象,在《酿造工艺学》的教学中引入创新综合实验,让学生自己设置实验内容,建立实验方案,并在教师的指导下从事探索性研究,在探索中掌握知识、培养技能。通过创新综合实验,同学们的实验操作技能和素质得到了良好的训练,同时也为学生们提供了实践的平台,学生可以将自己的创意通过创新综合实验付诸实践,极大地激发了他们探索问题、渴求知识的欲望和学习兴趣,并收到了良好的教学效果。

摘要：通过同源克隆法从花魔芋抗病植株中得到抗软腐病基因的同源片段,为筛选魔芋抗软腐病基因提供了科学依据。根据已知植物NBS-LRR类抗病基因同源序列(RGA)的保守区域设计简并引物,从抗软腐病花魔芋植株的基因组DNA与cDNA上得到抗病基因同源片段(RGAs),并对其结构进行分析。从抗软腐病花魔芋植株基因组中分离得到了一条500 bp的NBS-LRR类抗病基因同源序列,共获得6条特异序列,分别命名为RGAR1、RGAR2、RGAR3、RGAR4、RGAR5、RGAR6,6条魔芋RGAs在氨基酸水平上的同源性表现出多态性,序列相似性分析结果表明,这些魔芋抗病基因同源序列均包含P-loop、Kinase-2、Kinase-3及疏水结构域HD等保守结构域,与已知的抗病基因在氨基酸水平上的同源性为33%～63%。通过构建系统进化树分析,将这6个序列分为3个亚组,均属于TIR-NBS-LRR类抗病基因。在花魔芋上成功获得了抗病基因同源序列,将为魔芋中抗病基因的克隆、功能分析及定位等提供帮助。

摘要：以大豆分离蛋白为原料,通过米曲霉发酵作用生产大豆多肽。先以水解度为指标通过单因素实验初步得到发酵工艺条件,再根据Box-Benhnken的中心组合实验设计原则,在单因素实验的基础上采用3因素3水平的响应面分析法,建立了大豆多肽含量与各影响因子的回归方程,并得到以大豆多肽含量为响应值的响应面图和等高线图,进而得出米曲霉发酵大豆多肽的最佳工艺条件:发酵液初始pH6.03、发酵温度29.0℃、摇瓶转速154.5r/min、发酵时间60～70h,在此条件下大豆多肽的理论含量可达0.765mg/mL。

摘要：LRR-RLK家族基因编码的类受体激酶,在植物、动物的抗病过程中起着重要作用,本研究从高粱转录组测序的差异表达序列中筛选到1条具有完整开放阅读框的LRR-RLK基因序列,设计特异性引物并克隆,通过生物信息学方法分析该基因的序列特征、编码蛋白的理化特性、结构域以及进化关系等,并应用荧光定量PCR技术分析该基因在高粱不同组织中的表达活性。结果表明,克隆得到的LRR-RLK基因开放阅读框为1 233 bp,命名为"SbRLK2"。SbRLK2编码410个氨基酸,具有典型的LRR型类受体蛋白激酶结构DNA仅与小米及二穗短柄草具有较高同源性:其编码的蛋白与禾本科LRR-RLKs具有较高的同源性。SbRLK2蛋白质理论分子量为45.017 kD,理论等电点为5.85;是稳定疏水性蛋白,具有1个跨膜结构,不存在信号肽;亚细胞预测该基因主要在细胞核(30%)、微体(29%)、和线粒体(10%)中发挥生物学作用。组织特异性表达分析发现,SbRLK2在高粱的花序和叶中高表达,表达量分别是根部的41.3倍和54.3倍。SbRLK2基因在抗病高粱品种中表达量在接种丝黑穗病菌24 h后大幅度增加,72 h后表达量有所回落,而在感病品种中的表达量则一直较低,表达差异极显著,说明该基因与高粱的抗丝黑穗病相关。本研究结果为SbRLK2基因对高粱抗病的响应模式研究提供了理论参考。