摘要：sepsis是一类感染引起的严重临床综合征。1991年以后，其含义出现了一些重要变迁，并根据病情轻重分为sepsis、severesepsis、septicshock，我国目前分别译为“脓毒症、严重脓毒症、脓毒性休克”。烧伤、创伤、急救、呼吸等专业的学者对sepsis的现代定义已达成阶段性共识，但讨论依然热烈。从微生物学和感染病学角度看，某些问题颇需进一步深入探讨，特别是如何界定感染因子种类及sepsis的译名。正确理解sepsis的含义，有助于科学解读文献，合理设计科研，方便学术交流，理论和现实意义重大。

摘要：中草药在我国乃至世界范围内的应用历史悠久,合理选用确实具有治疗疾病、增强体质和延年益寿的功效.但在众多传媒广告及江湖游医等的误导下,公众常常认为中草药“纯天然、无毒副作用”.然而,正应了一句俗语“是药三分毒”,近10多年来中草药引起的肝损伤（herbal-inducedliverinjury,HILI）报道屡见不鲜,已成为临床上常见的肝病之一.

摘要：目的观察经过结构改建的丁型肝炎病毒核酶（ＨＤＶ核酶）对丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因组ＲＮＡ是否存在剪切作用。方法对ＨＤＶ基因组核酶的茎ＩＶ区和底物结合区进行改建，获得３种针对ＨＣＶ ＲＮＡ的ＨＤＶ核酶ＲｚＣ１、 ＲｚＣ２和ＲｚＣ３。体外转录制备含ＨＣＶ ＲＮＡ ５’一非编码区（５’－ｎｏｎｃｏｄｉｎｇ ｒｅｇｉｏｎ， ５’－ＮＣＲ）及部分 Ｃ区的底物 ＲＮＡ（ＨＣＶ ＲＮＡ ５’－ＮＣＲ－Ｃ），进行 ５’端放射性标记。在一定的 ｐＨ、温度、 Ｍｇ２＋浓度和有或无去离子甲酰胺存在等条件下，将核酶和底物按摩尔比１００：１混合，反应２ ｈ后聚丙烯酰胺凝胶电泳，放射自显影，推算剪切百分率。结果 ＲｚＣ１和ＲｚＣ２可剪切ＨＣＶ ＲＮＡ ５’－ＮＣＲ—Ｃ，在适宜浓度的去离子甲酰胺存在时剪切效率较高。ＲｚＣ３对底物几乎无剪切活性。结论设计得当的ＨＤＶ基因组核酶可以剪切异源性ＲＮＡ分子ＨＣＶ ＲＮＡ。

摘要：目的探讨我国HBV感染者中人类白细胞抗原（HLA）-A＊0201限制性特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）表位HBcAg（17-27）V／I变异体的病毒学背景特点。方法应用生物信息学方法分析GenBank中30条不同HBV基因型的病毒株HBcAg（18-27）区段的序列特点。设计错配引物，构建针对HBVB、C基因型HBcAg／18-27）V／I的PCR-限制性片段长度多态性分析（RFLP）筛选方法。以PCR—RFLP和测序方法检测来自我国8省区160份HBV基因型B、C标本的HBcAg（18-27）V／I基因特点。用表位预测网站分析不同HBcAg（18-27）特异性CTL表位基因变异体与HLA-A＊0201分子结合力的差异。结果成功构建了针对HBV基因B、C型HBcAg（18-27）V／I的PCR—RFLP筛选方法；在调查的HBVB、C基因型血清中发现HBcAg（18-27）V的阳性率仅为1．88％（3／160）；生物信息学分析显示HBcAg（18～27）I与HLA—A＊0201分子的结合力明显低于HBcAg（18-27）V（HLA Ligand评分123与156，SYFPEITHI评分22与24）。结论我国流行的主要HBV流行株中HBcAg（18～27）的最后一位氨基酸主要表现为异亮氨酸，而非缬氨酸；在进行细胞免疫学研究时，以HBcAg（18-27）V作为参照需要充分考虑这一病毒学背景。

摘要：核酶(ribozyme)是一类具有催化活性的RNA分子,可通过碱基配对特异地与相应的RNA底物结合,并在特定的位点切割底物RNA分子~[1].是基因功能阻断剂,被称为"分子剪刀".美国科学家Cech和Altman分别于1982年先后发现这种只有催化活性但不含蛋白质的核糖体RNA前体和RNase的成分~[2],后统一命名为"核酶".核酶作为基因治疗新药具有如下优点:1.一个核酶分子可切割多个病毒核酸分子;2.其作用是切断,不是单纯抑制,停药后复发的可能性小;3.与底物通过碱基配对结合,因而有较好的特异性;4.针对多个靶位设计串状排列的核酶,可提高切割效率,减少变异病毒逃逸的机会;5.兼具反义抑制效果~[3].鉴于核酶的这些优点,人们利用核酶可以特异性地切割靶RNA序列的特点,设计合适的核酶阻断特定基因的表达,相继对获得性免疫缺陷综合征、肿瘤、生殖系统疾病、肝炎、白血病、移植排斥反应等疾病进行了大量研究~[4]。结果表明，核酶作为基因治疗的一种方法有着广阔的应用前景和极度大的临床实用价值。

摘要：本文综述了能够剪切RNA分子的酶性DNA的种类、结构、作用机制、动力学特征及其在用作新型基因治疗药物方面的优势、设计要点。

摘要：目的　探讨丁型肝炎病毒 (HepatitisDvirus ,HDV)核酶用于抗丙型肝炎病毒 (HepatitisCvirus ,HCV)基因治疗的可能性。方法　以HDV基因组核酶的假结样结构为基础 ,优化其茎Ⅳ区 ,改建其底物结合区 ,获得 3种针对HCVRNA的HDV核酶RzC1、RzC2 和RzC3 。体外转录获取含HCVRNA 5’ 非编码区 ( 5’ noncodingregion ,5’ NCR)及部分C区在内的底物RNA(HCVRNA 5’ NCR C) ,并进行 5’端放射性标记。在pH 7.5、37℃、Mg2 + 2 0mmol/L和去离子甲酰胺 2 .5mol/L等条件下 ,将核酶和底物按摩尔比 1 0 0∶1混合 ,在不同的时间点观察剪切百分率。结果　RzC1、RzC2 对底物的剪切百分率随时间延长而递增 ,90min时分别达 2 4.9%、2 0 .3% ;未观察到RzC3 有剪切活性。

摘要：目的 观察丙型肝炎病毒(HCV)RNA特异性脱氧核酶的体外剪切活性,探讨其用于抗病毒基因调控的可能性。 方法 以HCV 5’-非编码区及部分C区(5’-NCR-C)中两个具有5’…A ↓ U…3’特征的序列为靶位,以5’GGCTAGCTACAACGA3‘为活性中心,设计并合成两端经硫代修饰的脱氧核酶(TDRz),即TDRz-127和TDRz1。用Nar 1将质粒pHCV-neo完全线性化后,以之为模板体外转录获取HCV 5’-NCR-C;用碱性磷酸酶去除其5’端磷酸,再用T4聚核苷酸激酶和γ-32P-ATP进行5’端放射陛标记。在pH7.5、Mg2+10 mmol/L等条件下,将两种TDRz分别(5μmol/L)或共同(各2.5μmol/L)与底物RNA(200 nmol/L)混合,经变性、复性后于37℃孵育,分别于不同的时间点取出等份终止反应。以8％变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和放射自显影分离、显示剪切产物,在凝胶成像分析仪上分析各条带光密度值并计算剪切百分率。 结果 在所设常用反应条件下于37℃孵育15、30、45、60、75、90min后,TDRz-127的剪切百分率分别达8.3％、16.1％、24.3％、26.2％、29.4％和31.1％,TDRzl的剪切百分率分别达7.4％,13.0％、15.6％、18.7％、19.4％和20.3％,两者同时剪切时的百分率约15.1％、29.6％、37.8％、39.1％、41.5％、42.6％。结论 TDRz-127和TDRzl对HCV

摘要：目的　对丙型肝炎病毒 (HepatitisCvirus ,HCV) 5′ 非编码区 ( 5′ Noncodingregion ,5′ NCR)靶向性脱氧核酶 (De oxyribozymes ,DRz)在靶基因调控性荧光素酶表达HepG2细胞中的活性进行评价。方法　根据HCV 5′ NCR中符合 5′…Y↓R… 3′(Y =A/G ,R =U/C)特征的位点及 5′ NCR的二级结构选择靶位 ,采用 10 2 3DRz基序 ,设计并合成HCV靶向性脱氧核酶DRz 2 3 2、DRz 12 7、DRz 84、DRz1以及两端被硫代修饰的DRz(Phosphorothioatedeoxyribozymes ,TDRz)和活性中心区人工突变的硫代DRz(MutantphosphorothioateDRz ,MDRz)。直接将其加入体外培养的受HCV 5′ NCR调控的表达荧光素酶HepG2细胞 (HepG2 970 6细胞株 )中 ,或用脂质体转染法将其导入靶细胞。用化学发光法检测荧光素酶活性 ,计算抑制率。结果　转染终浓度为 0 5 μmol/L的药物 2 4h后 ,DRz 2 3 2 /TDRz 2 3 2、DRz 12 7/TDRz 12 7、DRz 84/TDRz 84和DRz1/TDRz1的抑制率分别约14 3 %/ 14 9%、5 3 2 %/ 5 0 6%、2 5 6%/ 2 3 8%和 44 7%/ 43 3 %,均高于对应的MRz ,其中DRz 12 7/TDRz 12 7与MRz 12 7( 4 1 2 %)相比抑制率有显著性差别 (P <0 0 5 )。直接将TDRz 12 7或MRz 12 7加入细胞培养体系中被动作用 5h和 2 4h ,抑制率无明显差别 ,?

摘要：目的　观察特异性脱氧核酶 (DRz)在丙型肝炎病毒 (HCV) 5′ 非编码区 (5′ NCR)转基因肝癌细胞株中对靶RNA的抑制活性。方法　采用 5′ GGCTAGCTACAACGA 3′基序为活性中心 ,分析HCV 5′ NCR中符合 5′…R↓Y… 3′(R =A/G ,Y =U/C)特征的位点及 5′ NCR的二级结构以确定靶位 ,设计并合成HCV靶向性脱氧核酶DRz 2 32、DRz 12 7、DRz 84、DRz1以及对应的两端被硫代修饰的DRz(TDRz)和活性中心区人工突变的硫代DRz(MDRz)。用脂质体转染法将导入HCV 5′ NCR及部分C区 (5′ NCR C)的转基因肝癌细胞株HepG2 .970 6 中 ,作用一定时间后 ,用化学发光法检测荧光素酶活性的变化 ,计算抑制率。选择抑制率较高者进行时效关系的观察和不同浓度抑制效果的比较。结果　各DRz和对应TDRz的活性无明显差别。DRz 12 7/TDRz 12 7和DRz1/TDRz1的抑制活性相对较高 ,终浓度为 0 .5 μmol/L作用 2 4h抑制率分别达 5 3.2 % / 5 0 .6 %和 4 4 .7% / 4 3.3%。各DRz/TDRz的抑制率均高于对应的MDRz ,其中DRz 12 7/TDRz 12 7与MDRz 12 7(4 1.2 % )相比抑制率有显著性差异 ,P <0 .0 5。在 0 .2 5～ 0 .75 μmol/L范围 ,抑制率随药物浓度的升高而增高。在所观察的时间点中 ,加药后 2 4h抑制率最高 ,3d后抑制率显著下降 ;