摘要：抽油机链条封闭在抽油机链条通道内连续不间断运行，链条滚子与链轮外啮合，要求使用寿命＞3年。设计时偏重于考虑滚子须具有高的耐磨性，滚子的结构尺寸如图1，技术要求为：渗碳层深0.4～0.5mm，表层硬度73～76HRA，表层碳浓度0.8%～1.05%。但上机运行不到8个月，滚子碎裂比率超过30%，采用强化处理工艺（结构尺寸不变），硬度要求＞36HRC，但上机运行一年后，滚子碎裂比率仍不下8%。为此，我们做了几组试验，以便找出合理的技术要求，选择合理的热处理工艺，满足使用要求。1 试验方法及结果将16件滚子分成8组，每组2件，每组的材质、结构完全相同，工艺基本相同。试验采用小载荷多次冲击，冲击频率为145次／min，试验方法及结果见表1。2 试验结果分析（1）观察表1中A、B件可知，无论工件壁厚大小，在特定的范围内都不耐冲击，故这种外啮合用链条的滚子不能渗碳后使用。这是由于表层含碳量增加，淬火后韧性显著降低，表层裂纹的敏感性增加所至［1］。

摘要：猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是一种能引起严重腹泻、脱水的肠道病毒,PEDV的广泛流行对生猪养殖产业造成巨大经济损失,目前仍无有效的预防和治疗手段。Nsp8是一种参与PEDV复制的重要非结构蛋白,其存在相互作用的宿主蛋白尚不清楚。【目的】筛选与PEDV Nsp8互作宿主蛋白,初步探究互作宿主蛋白对PEDV复制的影响,为寻找PEDV新的关键性治疗靶点提供理论基础。【方法】利用真核表达载体pcDNA3.1(+)成功构建PEDV Nsp8真核表达质粒,通过免疫共沉淀、质谱分析及激光共聚焦等技术筛选能够与其相互作用的宿主蛋白,进一步在LLC-PK细胞中通过过表达、敲低等方法探究互作宿主蛋白对PEDV复制的影响。【结果】质谱检测筛选到Nsp8潜在互作宿主蛋白36个,验证了宿主蛋白热休克蛋白成员8(heat shock protein member 8,HSPA8)与Nsp8相互作用,在LLC-PK细胞中过表达HSPA8能够剂量依赖性抑制Nsp8蛋白过表达,而且在蛋白质和转录水平显著剂量依赖性抑制PEDV复制;干扰内源性HSPA8表达能够显著促进PEDV复制,TCID50和间接免疫荧光试验检测(indirect immunofluorescent assay,IFA)结果进一步证明了HSPA8抑制PEDV复制。【结论】本研究筛选出PEDV Nsp8的互作宿主蛋白HSPA8,并且证明HSPA8能显著抑制PEDV复制,为设计以HSPA8为靶点的预防或治疗药物提供新思路。

摘要：为了筛选出环形泰勒虫TRAP蛋白在虫体入侵媒介蜱唾液腺过程中相互作用蜱源蛋白,构建了能够用于酵母双杂交筛选系统的重组诱饵质粒pGBKT7-TRAP-A。本研究以环形泰勒虫裂殖体为材料,根据环形泰勒虫TRAP-A结构域的基因序列设计引物,经过PCR扩增获得576 bp的基因片段,将其连接到线性化载体pGBKT7上。经双酶切鉴定和序列分析以及重组诱饵质粒在酵母双杂交系统中的自激活、细胞毒性及其表达情况检测,结果显示,本研究成功构建了酵母双杂交重组诱饵质粒pGBKT7-TRAP-A,构建的诱饵质粒对Y2HGold酵母菌无自激活活性和细胞毒性,且构建的诱饵质粒pGBKT7-TRAP-A可以在Y2HGold酵母菌内正确表达。表明所构建的诱饵质粒pGBKT7-TRAP-A可以用于筛选小亚璃眼蜱唾液腺酵母双杂交c DNA文库,获得可能与环形泰勒虫TRAP-A蛋白相互作用的蜱源蛋白。

摘要：以大肠杆菌表达系统表达的猪δ冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)截短抗原S1-CTD蛋白作为包被抗原,建立能够检测血清特异性IgA抗体的间接ELISA方法。以本实验室分离保存的PDCoV流行株CH/XJYN/2016(MN064712)的S基因为模板设计合成特异性引物,通过RT-PCR扩增出S基因抗原表位区S1-CTD(877~1299 bp),构建原核表达载体pET24a-S1-CTD,经IPTG诱导表达重组蛋白S1-CTD,纯化后作为包被抗原建立了检测PDCoV特异性IgA抗体的间接ELISA方法。结果显示,抗原最佳包被质量浓度为8 mg/L,血清和酶标二抗最佳稀释比例为1∶10和1∶5000;S/P≥0.489判定为阳性,S/P<0.489判定为阴性。该方法与猪流行性腹泻病毒、猪嵴病病毒、口蹄疫病毒及猪瘟病毒的标准阳性血清均无交叉反应,特异性良好;批内和批间变异系数均小于10%,具有较好的重复性。间接ELISA检查方法的建立为PDCoV的血清学调查及免疫效果评价提供了有效的检测手段,为进一步开发临床检测试剂盒奠定基础。

摘要：在市政设施工程建设中,给排水管道属于基础性工程,同时也是十分重要的一项工程。在给排水管道工程施工过程中,一项十分重要的内容就是管道布设设计,同时在实际施工过程中也应当掌握科学合理的施工技术,从而使给排水管道工程质量能够得到有效保证,并且能够在实际运行过程中更好发挥其作用。本文就市政给排水管道布设设计及技术措施进行分析。