摘要：目的:利用质粒pSilencer3.1-H_1构建针对人血管内皮生长因子-C(VEGF-c)基因的表达载体,测序鉴定并观察在胃癌细胞中的表达.方法:根据质粒pSilencer3.1-H_1要求设计两对小干扰RNA靶序列,退火形成互补的双链,通过与线性化的pSilencer3.0-H_1相应位点连接、转化大肠杆菌,扩增、纯化得到所需质粒,酶切电泳及测序鉴定后转染胃癌细胞株SGC-7901,Western blot检测转染前后VEGF-C基因的蛋白表达.结果:经酶切和测序鉴定,针对VEGF-C基因的siRNA表达载体构建成功.转染胃癌细胞株SGC-7901后,Western blot检测显示VEGF-C基因蛋白表达明显降低,pSilencer3.1-VEGF-C1组抑制效果明显,其抑制率为81.2%,与阴性对照组相比差异具有显著性(P<0.05).结论:成功构建了针对人VEGF-C基因的siRNA表达载体和稳定转染的胃癌细胞株SGC-7901.

摘要：目的:构建针对人血管内皮生长因子C小干扰RNA表达载体,并观察其在胃癌细胞中的干扰效果。方法:实验于2006-02/2007-02在河南省分子医学重点学科开放实验室完成。①实验材料:小干扰RNA表达载体pSilencer3.1为美国Ambion公司产品;胃癌细胞SGC7901为河南省分子医学重点学科开放实验室保存;血管内皮生长因子C基因的干扰片断和聚合酶链反应引物(152bp)由上海生工生物公司合成。②实验过程:根据pSilencer3.1-H1载体要求设计靶向血管内皮生长因子C基因的两对小干扰RNA,退火后连接入载体相应位点,构建重组表达质粒。经酶切和测序鉴定后分别转染胃癌细胞株SGC-7901,经G418筛选,获得稳定表达的细胞株。③实验评估:采用反转录-聚合酶链反应和Westernblot法检测血管内皮生长因子CmRNA和蛋白水平的表达。结果:①重组质粒的酶切、核苷酸序列分析结果:经酶切和测序鉴定证实成功构建了血管内皮生长因子C小干扰RNA表达载体,建立了稳定转染细胞株。②稳定转染的细胞株中血管内皮生长因子CmRNA和蛋白表达:反转录-聚合酶链反应和Western blot显示转染后血管内皮生长因子C表达与对照组相比有不同程度的降低,以pSilencer3.1-neo-VEGF-C1尤为明显,抑制血管内皮生长因子C表达,不影响细胞的生长。结论:成功构建了血管内皮生长因子C小干扰RNA表达载体及稳定转染的胃癌细胞株。

摘要：为了适应“互联网+”视域下教育信息化的发展,文章分析了目前的教学现状,构建了信息化、高效率的新型高职《病理生理学》教学模式,更从教学设计、学习模式、教学评价等方面进行了探讨,努力培养学生的自主学习能力,提高教师的教学能力。尽管如此,“互联网+”视域下高职《病理生理学》教学模式仍面临一些问题,需要深入研究和探讨。

摘要：高职教育各门课程的第一节课是绪论,用于介绍本门课程的任务、内容、地位、研究方法等,在课程中起着提纲挈领作用,其讲授效果直接影响学生对本门课程的学习兴趣、态度和效果。在临床医学专业病理学绪论教学中融入课程思政教育,对实现高职院校人才培养目标具有重要意义。本文对临床医学专业病理学绪论教学中从哪些方面进行课程思政进行了探索和设计。

摘要：病理学是一门连接基础医学与临床医学的“桥梁”学科[1],是医学生重要的基础必修课,内容繁杂、抽象枯燥,不容易理解。临床上血栓形成非常常见,如脑动脉血栓形成引起的脑梗死、冠状动脉血栓形成引起的心肌梗死、手术后长期卧床的患者继发血栓形成等,且危害极大[2]。对于临床医学专业的学生来说,这一节内容尤为重要。只有很好地理解掌握血栓形成的条件和机制,明确血栓形成对机体的影响,才能够在临床工作中预防和减少血栓形成。本文就河南医学高等专科学校病理学授课《血栓形成》这一节内容进行了详细的教学设计,优化教学内容,旨在提高授课质量,增强教学效果。