摘要：目的建立简便易行、经济适用的MGMT基因4个单核苷酸多态性位点的检测方法。方法应用碱基错配创造酶切位点原理设计引物,通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术判断MGMT基因四个SNP位点多态性。结果设计一对引物PCR扩增含MGMT84多态位点的DNA片段,另一对引物PCR扩增含MGMT基因143、160、178三个多态位点的DNA片段,使用4种限制性内切酶分别酶切判断4个位点多态性,PCR和酶切效果均较好。结论应用创造酶切位点PCR-RFLP原理建立的MGMT四个多态位点的检测方法具备简便、经济、快速的特点。

摘要：背景：新生神经元可诱导产生长时程增强，NMDA受体亚基NR2B的激活在成熟神经元诱导的长时程增强中有重要作用，但其对由新生神经元诱导的长时程增强的影响尚未见报道。目的：观察NR2B受体拮抗剂R025-6981在大鼠齿状回新生神经元诱导的长时程增强中的作用。设计、时间及地点：脑片电生理实验，于2007—02／06在山西医科大学神经生物实验室完成。材料：3月龄雄性Wistar大鼠26只，由山西医科大学实验动物中心提供。方法：大鼠麻醉后断头取脑，分离海马，制备400μmol／L脑片。采用细胞外微电极记录技术，于海马齿状回分子层内侧1，3处采用双极钨电极进行低频刺激，获得稳定的刺激曲线后，在高频强直刺激下诱导长时程增强。长时程增强的诱导程序为每串刺激频率100Hz，持续500ms，间隔20s，共4串刺激，记录到兴奋性突触后电位〉1mV以上的脑片用于下述两项实验。①NR2B拮抗剂Ro25—6981阻断人工脑脊液诱导的长时程增强：脑片分为2组，人工脑脊液组持续通以含有95％O2和5％CO2的人工脑脊液，人工脑脊液＋Ro25．6981组在强直刺激前应用3μmol／LNR2B拮抗剂Ro25-6981作用10min，后续步骤同上组。②NR2B拮抗剂Ro25—6981抑制荷包牡丹碱诱导的长时程增强：脑片分为2组，荷包牡丹碱组在强直刺激前给予10μmol／L荷包牡丹碱灌流10min，荷包牡丹碱＋Ro25—6981组在强直刺激前同时给予3μmol／L Ro25．6981和10μmol／L荷包牡丹碱灌流10min。主要观察指标：长时程增强记录结果。结果：①强直刺激后50-60min，人工脑脊液组长时程增强（107．85±1．34）％，人工脑脊液＋Ro25-6981组长时程增强（100．75±2．75）％，两组比较差异有显著性意义（P〈0．05）。②强直刺激后50-60min，荷包牡丹碱组长时程增强（164．67±2．40）％，荷包牡丹碱＋Ro25-6981组长时程增强（147．56±6．63）％，两组比较差异有显著性意义（P〈0．05）。结论：在大鼠海马齿状回区域，NR2B受体拮抗剂Ro25-6981阻断了人工脑脊液诱导的长时程增强，并部分抑制了荷包牡丹碱诱导的长时程增强，提示NR2B受体拮抗剂可以抑制新生神经元诱导的长时程增强。

摘要：目的探讨肿瘤坏死因子（TNF）α和β基因多态性与矿工矽肺遗传易感性的关系。方法采用病例对照设计,以男性矽肺病人183例为病例组,111例无矽肺的男性接尘矿工为对照组。应用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）技术检测TNFα-308、-238和TNFβ＋252位点的多态性。结果TNFα-308、-238和TNFβ＋252各位点基因型在病例组和对照组间的分布差异均无统计学意义（P〉0.05）,但吸烟且携带-308A等位基因的接尘工人更易发生矽肺（OR=2.50,95%CI=1.17～5.37）。病例组中-308G/-238 G/＋252G和-308A/-238 G/＋252A单倍型分布频率显著高于对照组（P〈0.01）。结论TNFα-308、-238和TNFβ＋252位点基因多态在矽肺发病的遗传易感性中不起主要作用,但TNFα-308多态性与吸烟有交互作用。单倍型-308G/-238G/＋252G和-308A/-238G/＋252A可能是矽肺发生的易感性标记。

摘要：目的探讨FAS和FASL基因多态性与矿工矽肺遗传易感性的关系。方法采用病例对照设计，以183例男性矽肺患者为病例组，111例无矽肺的男性接尘矿工为对照组，调查研究对象的一般情况及职业史，收集现场粉尘浓度资料，估算工人既往累积总粉尘接触量；应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）技术检测FAS-1377、FAS-670及FASL-844位点的多态性，分析多态性与矽肺患病及矽肺期别的关系，基因间以及基因与环境因素间的交互作用以及单倍型。结果FAS-1377、FAS-670及FASL-844各位点基因型在病例组和对照组间的分布差异均无统计学意义（P〉0．05）：不同期别矽肺患者中FAS-1377、FAS-670及FASL-844位点多态分布差异无统计学意义（P〉0．05）；病例组中FAS-1377G／-670G单倍型分布频率为9．6％，明显高于对照组（3．6％），差异有统计学意义（P〈0．05）；各基因多态间、基因多态与累积总粉尘接触量以及基因多态与吸烟状况之间的交互作用分析结果均无统计学意义（P〉0．05）。结论FAS-1377、FAS-670及FASL-844多态性在矽肺发病的遗传易感性中不起主要作用。单倍型FAS-1377G／-670G可能是矽肺发生的易感性标记。

摘要：目的探讨氯乙烯（VCM）致染色体损伤与DNA修复基因和代谢酶基因多态间的关系。方法收集上海某化工厂402名VCM接触工人健康体检资料、人口学资料（年龄和性别）、生活方式（吸烟、饮酒）和职业接触等因素，评估个人VCM累积接触剂量并分组。采集静脉血3ml，采用外周血淋巴细胞胞质分裂阻滞微核试验（CBMN）检测染色体损伤，采用聚合酶链式反应（PCR）检测GSTT1、GSTM1基因缺失情况，采用PCR-限制性片段长度多态性技术（RFLP）检测其他基因多态。结果多元Poisson回归分析结果表明，中（4000～40000mg）、高（〉40000mg）VCM接触剂量组染色体损伤的风险明显高于低剂量组，调整后的FR值分别为1．19（1．06-1．34）和1．20（1．06～1．38），差异有统计学意义（P值分别为0．003和0．01）；携带CYP2E1和XRCC1 Arg280His突变型基因的个体微核率明显高于野生型个体，调整后的FR值分别为1．12（1．02～1．23）和1．13（1．02～1．25），差异有统计学意义（P值均为0．02）；携带GSTP1 Val/Wal和ALDH2Glu／Glu基因型个体微核率明显高于其他基因型个体，调整后的FR值分别为0．74（0．59，0．94）和0．87（0．79～0．95），差异有统计学意义（P值分别为0．01和0．003）。结论VCM致染色体损伤与VCM累积接触剂量增高及GSTP1 Val／Val、CYP2E1c1c2／c2c2、ALDH2Glu／Glu、XRCC1280His/His或Arg／His基因型多态性等因素有关。开展VCM致染色体损伤与遗传易感性方面的研究，有助于VCM致癌机制的阐明，而研究中易感性多态位点的发现也可以为识别易感人群提供理论依据。

摘要：目的探讨氯乙烯（VCM）暴露工人代谢酶基因多态性与外周血淋巴细胞DNA损伤的关系。方法应用彗星实验测定145名VCM暴露工人外周血淋巴细胞DNA损伤情况，并按DNA损伤情况将工人分为DNA损伤组和对照组，采用病例一对照设计，PCR-RFLP测GSTP1A／G、CYP2E1c1／c2、CYP2D6LG／C基因多态；PCR法测GSTT1、GSTM1缺失情况。同时，通过问卷调查的方式了解被调查者的年龄、性别、吸烟、饮酒和个人职业暴露史。结果GSTP1 AA和AG＋GG基因型在DNA损伤组和对照组间的分布频率分别为60．7％，39．3％和78．7％，21．3％，经检验，两组间的分布差异有统计学意义（P〈0．05）；GSTT1、GSTM1、CYP2E1和CYP2D6L各基因型的分布频率在DNA损伤组和对照组间的差异无统计学意义（P〉0．05）。多元Logistic回归分析的结果表明，GSTP1多态在氯乙烯所致DNA损伤中的作用与单因素研究结果一致，携带GSTP1 AG＋GG基因型的个体较携带GSTPlAA基因型个体DNA损伤的风险性升高（OR=2．48，95％CI：1．11～5．53，P〈0．05）；其他因素两组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论代谢酶GSTP1基因型与VCM诱导的DNA损伤有关，携带GSTP1 AG或GG基因型个体可能为氯乙烯致DNA损伤的易感人群。

摘要：1区2区和11区危险场所用起重设备须装有电气操作装置和机械运动部件。该设计须达到不引起爆炸性气体—空气混合物引燃的目的。 就电气部件和机械部件的生产品种范围来讲,R.斯达尔运输技术股份有限公司是该行业的专业厂商。 1.0 起重设备元件 目前有一系列的防爆缆绳电动吊车适用于吊运货物。其负载范围不超过50,000kg（见下表）。 关于标准型电动吊车,防爆型式和温度组别按照欧洲标准EN50014/50018/50019分为EExdeⅡBT4和EExdeⅡCT4。

摘要：[目的]探讨DNA损伤修复基因X线修复交叉互补基因（1X-ray repair cross complementing gene 1,XRCC1）、人8-羟基鸟苷糖苷酶1基因（human 8-oxoguanine DNA glycosylase-1,hOGG1）以及O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因（O6-methyl-guanine DNA methyltransferase,MGMT）的多态性与氯乙烯致人外周血淋巴细胞染色体损伤的关系。[方法]采用胞质阻滞微核试验方法（CBMN）评价313名氯乙烯接触工人和141名对照工人染色体损伤水平,应用聚合酶链反应-限制性片段多态性技术（polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP）对接触工人XRCC1基因Arg194Trp、Arg280His和Arg399Gln 3个位点和hOGG1基因Ser326Cys位点及MGMT基因Leu84Phe位点进行多态性检测。采用SAS软件包进行统计分析,计算率比（frequency ratio,FR）及其95%可信限（95%confidence interval,95%CI）。[结果]本研究表明,氯乙烯接触工人的微核率为（4.86±2.80）‰,显著高于对照人群的微核率（1.22±1.24）‰（P〈0.01）。携带hOGG1 326 Ser/Cys基因型（FR=1.21,95%CI：1.02~1.46;P〈0.05）、XRCC1 194Arg/Trp基因型（FR=1.12,95%CI：1.00~1.25;P〈0.05）和XRCC1 280 Arg/His和His/His基因型（FR=1.12,95%CI：1.00~1.26;P〈0.05）的个体均易发生染色体损伤。在易感性的双体型中,携带CGA/CAG的个体相比携带野生型CGG/CGG的个体微核率明显升高（FR=1.67,95%CI：1.19~2.23;P〈0.05）。接触组人群的微核率随着年龄的增长显著升高（FR=1.13,95%CI：1.00~1.28;P〈0.05）。对XRCC1基因型进行联合分析,发现随着剂量增加和携带突变等位基因数目增多,其染色体损伤风险增大。[结论]胞质阻滞微核可以作为氯乙烯接触工人早期健康损害的敏感指标,基因型XRCC1 Arg194Trp、Arg280His、hOGG1 Ser326Cys和双体型CGA/CAG以及年龄增长可能对氯乙烯致工人染色体损伤的过程产生影响。氯乙烯累积接触水平与XRCC1基因型也可能存在一定的交互作用。

摘要：目的为广大参与I临床研究的医生在进行临床试验设计过程中如何正确规范地撰写试验方案提供参考。方法通过解析国内临床试验方案中常见的技术细节和报告规范问题，展开探讨。结果在临床试验方案中常见的典型问题有：立题思路不明确、研究类型选择错误、PICO要素考虑不全、随机化和盲法应用不当、统计分析计划缺失、样本量计算不正确、报告格式不规范等。结论不少临床医生缺乏对临床试验设计要点的掌握以及方案报告规范的了解，而临床试验方案的质量在一定程度上决定了整个研究的成败，因此谨慎把控PICO要素、方法学和统计学应用等技术细节，并按c0N50R丁和SPIRIT声明撰写方案，是每一位参与临床研究工作者都值得注意的关键点。