摘要：目的　探讨白血病细胞多药耐药发生的分子机理,寻找新的多药耐药相关基因。方法　以HL- 6 0细胞为“驱动方”,以多药耐药细胞系HL- 6 0 / VCR为“实验方”,建立人白血病多药耐药细胞系HL-6 0 / VCR抑制消减杂交文库,利用基因芯片技术从中筛选出一条在野生型HL - 6 0细胞中基本不表达,而在HL - 6 0 / VCR耐药细胞中呈低丰度差异表达的新表达序列标记序列。用表达序列标记拼接的同源基因克隆法得到人类新基因HV12 6序列,再利用生物信息学数据库和软件对其进行功能的预测和分析。最后针对推导序列开放阅读框设计引物,逆转录-聚合酶链反应检测推导HV12 6基因序列在临床白血病患者化疗前后白血病细胞中的表达。结果　HV12 6的c DNA序列长1991bp,编码36 5个氨基酸,其编码蛋白序列局部与新近发现的在细胞凋亡与炎症反应中起重要作用的蛋白基序“PYRIN”存在约4 3%的相似性。逆转录-聚合酶链反应结果提示该基因与白血病细胞受化疗药物的作用和耐药存在联系。结论　HV12 6可能是与白血病细胞耐药相关的一条新基因,有必要对该基因进行进一步的实验室克隆与功能研究。

摘要：背景环状RNA在多种疾病中发挥重要作用,但目前尚无环状RNA在儿童哮喘中的研究报道。有报道环状RNA circHIPK3在过敏性鼻炎中调控Th2细胞的分化。目的探讨环状RNA circHIPK3在儿童哮喘发病中可能的作用机制。设计收集临床样本,检测circHIPK3的表达并检测其与T细胞转录因子的相关性。构建小鼠哮喘模型进一步验证。进行相关的生物信息学分析,并分析circHIPK3与儿童哮喘相关临床指标的相关性。方法纳入2017年8月26日至2019年8月5日复旦大学附属儿科医院呼吸科门诊确诊的哮喘患儿(哮喘组),以同期体检的健康儿童作为对照组。分离两组外周血单个核细胞(PBMCs),通过qRT⁃PCR检测circHIPK3和T盒子转录因子(T⁃bet)在两组的表达情况,并进行相关性分析。建立蟑螂提取物(CRE)诱导的小鼠哮喘模型,用qRT⁃PCR检测小鼠肺组织中的circHIPK3、T⁃bet的表达情况。通过生物信息学分析circHIPK3与T⁃bet之间的调控关系。分析circHIPK3与外周血嗜酸性粒细胞的相关性。主要结局指标circHIPK3和T⁃bet的相对表达量以及二者的相关系数。结果哮喘组43例,均为轻度哮喘,男35例,中位年龄6.5岁。对照组28例,男22例,中位年龄6.4岁。与对照组相比,circHIPK3(t=4.627,P<0.001)和T⁃bet(t=2.727,P<0.01)在哮喘组PBMCs中均呈低表达;在哮喘患儿中circHIPK3与T⁃bet呈正相关(R=0.4830,P=0.0007)。哮喘小鼠肺组织中的检测结果与之一致。检索GEO数据库发现,哮喘患儿miR⁃485⁃3p增高。生物信息学分析发现:circHIPK3与miR⁃485⁃3p存在竞争结合关系,T⁃bet是miR⁃485⁃3p的可能靶基因。哮喘患儿中,circHIPK3与外周血中嗜酸性粒细胞数量呈负相关(R=-0.3692,P=0.0191)。结论circHIPK3在儿童哮喘和哮喘模型小鼠中表达下调,可能通过吸附miR⁃485⁃3p的方式影响T⁃bet的表达,引起Th1/Th2失衡,影响哮喘的炎症表现。