摘要：目的通过响应面法研究和优化刺五加根废弃物多糖的提取工艺。方法采用苯酚-硫酸法对刺五加根废弃物多糖进行定量分析,在单因素实验的基础上,运用响应面法设计对刺五加根废弃物多糖的提取工艺进行优化。结果响应面优化所得最好条件分别为温度80℃、提取时间1.5 h、液料比21,在最优条件下多糖的平均提取率为10.14%。结论响应面法对刺五加根废弃物多糖的提取条件优化合理,为后续刺五加根废弃物的再资源化开发利用提供一定的理论基础。

摘要：目的探讨石蒜碱通过激活微管相关基因STMN1阻滞人乳腺癌MCF-7细胞周期相关分子机制。方法MCF-7细胞给予石蒜碱干预后,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术检测G_(2)/M期细胞比例、磷酸化组蛋白H3(phosphorylated histone H3,p-H3)表达;荧光显微镜观察石蒜碱对MCF-7细胞微管形态的影响;qRT-PCR检测MCF-7细胞周期、骨架及微管相关基因的表达;Western blotting检测MCF-7细胞内5个周期阻滞相关蛋白的表达。结果石蒜碱对MCF-7细胞的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC_(50))为13.98μmol/L。石蒜碱呈剂量相关性地将MCF-7细胞阻滞于G_(2)/M期(P<0.01),并增加p-H3表达(P<0.05、0.01)。当石蒜碱浓度为28μmol/L时,细胞微管形态接近于阳性对照药物长春新碱。石蒜碱可下调5个信号传导相关基因,上调2个微管相关基因,下调2个M期相关基因,进而下调5个周期阻滞相关蛋白。相关性分析表明石蒜碱通过激活微管相关基因STMN1,导致微管动态平衡被破坏,最终导致M期阻滞。抑制STMN1基因后,石蒜碱无法将MCF-7细胞周期阻滞在M期。结论石蒜碱抑制MCF-7细胞增殖并通过促进微管解聚将其阻滞于M期,且阻滞M期的关键位点是基因STMN1,为未来药物设计和癌症治疗策略的探索提供了有价值的信息。