摘要：为了提高盐渍土氮素肥力和小麦产量,达到改良培肥、增产增效的目的,2017-2019年在滨海盐渍土区进行田间试验,研究盐渍土氮肥与有机肥的运筹模式。田间试验按裂区设计,在同一施氮(N)量225 kg/hm^2条件下,分设3个速缓效氮肥掺混比例:100%∶0(F1),50%∶50%(F2),30%∶70%(F3);3个有机肥用量:6 t/hm^2(O1),12 t/hm^2(O2),15 t/hm^2(O3),不施氮肥和有机肥处理为空白对照(CK)。结果表明,与其他速缓效氮肥掺混比例和有机肥用量相比,F3O3处理能有效降低盐渍土耕层水溶性盐含量0.7%~9.5%;土体剖面20-100 cm各土层硝、铵态氮含量与耕层相比分别降低1.3%~42.3%,3.8%~44.3%,有效减少了氮素淋出耕层;小麦返青期至成熟期耕层土壤速效硝、铵态氮含量分别显著提高16.6%~59.8%,21.5%~60.4%;两季小麦分别增产5.9%~47.0%,8.3%~46.6%,并提高了氮肥利用效率和经济效益。因此,小麦播前撒施速缓效比例30%∶70%掺混氮肥225 kg/hm^2配施有机肥15 t/hm^2(F3O3)并翻耕与耕层混匀能够有效降低滨海盐渍土耕层盐分,减少氮素淋失,提升耕层土壤的供氮能力,并达到增产增效,是滨海盐渍土改良培肥最优的氮肥与有机肥运筹模式。

摘要：为建立一种快速同时检测猪博卡病毒(PBoV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的方法,本研究根据GenBank中登录的PBoV不同基因型序列和PCV2全基因组序列,设计2对特异性引物,通过对扩增条件进行优化,建立了能够同时检测PBoV和PCV2的双重PCR方法。该方法可以同时扩增出PBoV的209 bp和PCV2的476 bp特异性片段,而对伪狂犬病毒、猪细小病毒、沙门氏菌、大肠埃希氏菌DNA模板扩增结果均为阴性,对PBoV和PCV2的最低检出量均为100拷贝/μL。单重PCR与双重PCR检测符合率为100%,结果表明,所建立的双重PCR特异性强,重复性好,敏感性高,为PBoV和PCV2的快速检测提供了有效的技术支持。

摘要：为建立快速检测不同基因型猪博卡病毒(PBo V)的PCR方法,本研究参考Gen Bank中登录的5种基因型PBo V1、PBo V2、PBo V3、PBo V4及PBo V5,设计了2对引物,通过对扩增条件进行优化,建立了PBo V1/2和PBo V3/4/5的双重PCR检测方法。特异性试验结果表明,该方法可以同时扩增PBo V样品327 bp(PBo V1/2)和209 bp(PBo V3/4/5)的特异性片段,而对猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒等其他病原核酸扩增均为阴性。敏感性试验显示,该PCR方法对PBo V1/2和PBo V3/4/5的最低检出量分别为100拷贝/μL和1 000拷贝/μL。重复性试验显示该双重PCR检测方法具有良好的可重复性。应用该方法和单项PCR对30份临床样品进行检测,结果显示,同时感染PBo V1/2和PBo V3/4/5的阳性率为10%,并且两种方法符合率为100%。本研究建立的方法适合对PBo V1/2和PBo V3/4/5的联合检测。

摘要：约束选址问题是一个多目标约束优化问题,传统算法(加权法)一次只能得到一个候选解,用多目标演化优化算法对其进行求解,可以一次得到多个候选解,给决策者提供更多的选择余地,以期获得更大的利益。数字试验表明,该方法优于传统多目标优化方法。

摘要：为了建立一种快速和高通量检测猪博卡病毒(PBoV)的方法,本研究根据GenBank中登录的PBoV 1/2型NS1基因高度同源保守序列设计并合成一对特异性引物,建立了检测PBoV1/2的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法。结果表明,该方法对常见的其它病毒均未检测到荧光信号,而仅对PBoV1/2检测为阳性;其灵敏度为45拷贝/μL,比常规PCR方法高100倍;组内和组间变异系数均小于5%。本实验建立的荧光定量PCR方法具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,为PBoV的早期诊断和定量分析PBoV感染程度提供参考。

摘要：通过分析GenBank上登录的猪博卡病毒3/4/5型(PBoV3/4/5型)基因序列,发现这些基因序列中存在一段高度同源性保守序列,针对该序列设计并合成1对引物,成功建立了可同时扩增出PBoV 3/4/5型的PCR检测方法。对2013年8月至2014年5月河南省50份临床腹泻仔猪小肠样品进行检测,结果 21份为PBoV阳性,阳性率为42%,表明PBoV在河南省猪群中存在一定流行。本试验建立的PCR方法对PBoV3/4/5的检测具有简便、快速、灵敏度高和特异性强的特点,为PBoV 3/4/5型的快速检测提供了有效的技术支持。

摘要：参考GenBank中登录的猪细小病毒(PPV)(M38367.1)基因序列,设计1对可以扩增出约1.6kb PPV VP2基因片段的特异性引物,上、下游引物的5′端均引入BamHⅠ酶切位点,PCR扩增得到VP2目的片段后,连接到pMD18-T载体中得到重组质粒pMD-VP2。取本实验室构建的含绿色荧光蛋白标记基因的伪狂犬病毒(PRV)通用转移质粒pG和构建好的pMD-VP2质粒,用BamHⅠ对质粒pG和pMD-VP2进行酶切,然后用CIAP对酶切产物进行去磷酸化处理,纯化回收后将VP2基因插入pG质粒中获得重组伪狂犬病毒转移质粒pGVP2。用脂质体转染法将PRV HB-98株全基因组与质粒pGVP2共转染ST细胞,得到携带有PPV VP2外源抗原基因和绿色荧光蛋白标记基因的重组伪狂犬病毒rPRV-VP2株。结合VP2基因PCR扩增和绿色荧光观察,经5轮病毒空斑纯化得到了纯化的重组病毒rPRV-VP2株。

摘要：猪博卡病毒(PBo V)是2009年新发现的一种DNA病毒,常于腹泻仔猪体内检测到该病毒。为建立该病毒的检测方法,本研究根据Gen Bank中登录的PBo V 1/2型的高度同源保守序列设计一对特异性引物,经PCR扩增条件优化,建立了PBo V 1/2型的PCR检测方法。特异性试验结果显示,该PCR方法仅从PBo V 1或2型的阳性病料样品中特异性的扩增出751 bp的目的片段,而对猪伪狂犬病毒、圆环病毒、大肠杆菌、沙门氏菌的核酸样品的扩增结果均为阴性。敏感性试验显示,该PCR方法对PBo V 1/2重组质粒标准品的最低检测量为34.8拷贝/μL。对来自河南中牟、开封、兰考、濮阳、洛阳等地猪场发生腹泻疫情的70份猪病料样品,采用该方法进行检测,其中10份样品呈PBo V 1/2型阳性,阳性率为14.29%。该PCR检测方法的建立为PBo V1/2型的诊断和监测提供技术支持。

摘要：针对物流装备制造企业对外服务业务的工具箱在客户间流转进行研究,提出了一种新的调度方法。首先描述了工具箱调度的重要性,分析了现有工具箱调度的现状和需求,建立了对外服务业务对象模型,在客户需求、工具箱内容、时间状态、就近原则、工具箱使用频度等约束条件下,筛选出适合具体任务的工具箱,在此基础上应用深度学习算法,选出符合任务要求的工具箱,进行工具组合,从而实现多目标决策。实验设计四种对象,采用特征值归一化方法,并将训练后的网络模型分配属性权重,进一步,当推荐的案例未能满足给定的相似度阈值时,引入属性优先级的概念,通过多隐层的数据采样,将局部优化结果组合,并在原有的逐层预训练和整体精调之间进行额外的预训练,有效地提高了学习精度。最后进行算例分析,证明了这种调度算法的可行性。

摘要：为了解猪伪狂犬病毒（PRV）gE基因的遗传变异特性,根据Gen Bank已发表的PRV gE全基因序列,设计并合成1对特异性引物,对PRV YZ株进行了gE全基因的扩增、克隆及测序,并与其他参考毒株gE基因进行比较序列分析。测序结果表明,YZ株gE全基因序列由1862bp组成,与GenBank已发表的13株PRV gE参考株序列同源性介于97.9%-99.9%。进化树分析表明,YZ株与目前国内流行的毒株在同一进化分支内,与国外分离株有一定差异。