摘要：根据人参和人参属其他物种的18S rRNA基因序列差异设计特异引物和探针,建立人参TaqMan实时荧光PCR鉴定方法.应用该方法测试58个样品,包括30个不同来源的人参样品、 15个其他人参属样品以及13个形态近似样品.结果表明:所有供试的人参样品均表现为阳性扩增,非人参及空白对照均未出现阳性扩增.灵敏度检测结果显示:此实时荧光PCR方法的最低检测限为0.03 pg/μL反应.此方法可快速、准确、灵敏地鉴定人参及其加工产品,适用于口岸进出口鉴定.

摘要：分析了沥青砼路面结构内部积水的根源,沥青砼路面结构早期破坏的现象及机理,论述了路面水害原因,提出了在路面结构设计阶段应考虑并应注意的预防措施。

摘要：为建立反刍动物埃立克体(***)准确定量的微滴数字PCR方法(ddPCR),本研究以***-inantium pCS20基因为靶基因,选取保守区域设计引物和探针,建立了*** ddPCR方法。利用本研究建立的ddPCR方法检测***、牛巴贝斯虫、牛双芽巴贝斯虫、环形泰勒虫、无形体、犬埃立克体、牛埃立克体、马埃立克体和立氏埃立克体等,结果显示仅***出现特异性扩增,而与其他寄生虫均无交叉反应,特异性强;将pUC57-pCS20重组质粒标准品10倍倍比稀释(1×10^(-1)拷贝/μL~1×10^(5)拷贝/μL)后,利用该ddPCR方法检测,结果显示,该方法对重组质粒标准品的检测限为1.8拷贝/μL,比相应荧光定量PCR方法的敏感性高10倍,本实验建立的ddPCR方法敏感性高;批内和批间重复性试验结果变异系数(CV)均小于2%,重复性好。利用建立的ddPCR方法对50只钝眼蜱样品检测,结果显示,阳性样品反刍动物埃立克体核酸的最低拷贝数为26拷贝/μL,ddPCR和荧光定量PCR检测试剂盒的检出率均为16.0%(8/50)。本研究首次建立的ddPCR方法敏感性高、特异性强、重复性好,可作为***准确定量检测的有效手段。

摘要：目的观察帕瑞昔布钠对眼内容剜除联合义眼座植入手术患者术后镇痛效果的影响。设计随机对照临床试验。研究对象复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科连续收治的在全麻下行眼内容剜除联合义眼座植入手术的患者60例。方法采用随机数字表法将以上患者分为两组，A组在全麻诱导前和手术结束前分别静脉注射帕瑞昔布钠40mg，术后第1天起每天2次给予肌肉注射帕瑞昔布钠40mg，共2天；B组在上述时间点静脉注射或肌肉注射2m1生理盐水。采用视觉模拟评分法（VAS）记录苏醒后即刻（T1）、术后4h（T2）、24h（T3）、48h（T4）的镇痛效果，观察药物的副作用。主要指标VAS评分，药物副作用。结果T1。T3时A组VAS评分分别为1．83±0．70、1．17±0．65、0．93±0．58；B组VAS评分分别为2．87±1．04、2．30±0．92、1．40±0．62。A组评分明显低于B组，差异有统计学意义（P均=0．000）。T4时两组评分分别为0．57±0．50、0．67_＋0．57，两组比较差异无统计学意义（P-0．051）。未观察到帕瑞昔布钠明显的副作用。结论帕瑞昔布钠对于眼内容剜除联合义眼座植入手术的患者术后早期（24小时内）具有良好的镇痛作用。

摘要：目的建立基于分子生物学鉴定林蛙油真伪的检测方法。方法采集成年雌蛙卵巢组织,经风干制成林蛙油,通过改良方法提取总DNA,以已报道的东北林蛙、黑龙江林蛙、黑斑侧褶蛙、牛蛙和中华蟾蜍的COI及cytB基因为模板,设计引物探针。结果 PCR扩增产物测序结果中仅东北林蛙获得230 bp左右产物,且序列比对与东北林蛙COI序列一致性为99%左右,说明实验对象林蛙为东北林蛙。结论利用线粒体基因独特的优势,应用PCR扩增东北林蛙COI基因,通过测序确定东北林蛙亚种,建立了东北林蛙亚种及其产品的鉴别方法。

摘要：为了建立山羊痘病毒(Goat pox virus,GTPV)和绵羊痘病毒(Sheep pox virus,SPPV)快速荧光PCR检测方法,本研究对2种病毒的保守基因P32基因在GeneBank上进行Blast比对,设计合成特异性荧光PCR引物和探针,构建了该病原特异性基因P32的重组质粒。建立了可以同时检测山羊痘病毒和绵羊痘病毒荧光PCR方法,对方法的特异性、敏感性和重复性进行研究,结果显示该方法具有高度的特异性,除了识别山羊痘病毒和绵羊痘病毒基因组外,对羊的基因组及山羊和绵羊常见病原的基因组均不发生交叉反应。在敏感性和重复性实验中,该方法对山羊痘病毒和绵羊痘病毒的检测限为1000Copies·mL-1,变异系数小于3%,因此具有优良的敏感性和稳定性。用该方法检测实验室模拟制备的样品,检测结果与预期相符合。

摘要：根据GenBank中犬细小病毒(CPV)和犬冠状病毒(CCV)基因序列各设计了一对引物,经试验条件的优化,建立了检测CPV的PCR方法和CCV的RT-PCR方法,扩增目的片段大小分别为337bp和852bp。在此基础上建立了检测CPV和CCV双重PCR方法。该双重PCR方法能特异的扩增CPV和CCV,且分别扩增出1.08ng和3.2ng总核酸量。通过检测96份临床样品,对双重PCR方法和胶体金试纸条方法进行了对比试验。结果表明,建立的双重PCR方法快速、敏感、特异性高,可以用于CPV和CCV鉴别检测。

摘要：建立Taq Man实时荧光PCR反应检测转基因抗虫大豆MON87701品系的鉴定方法,为转基因大豆MON87701提供科学的检测依据。根据转基因抗虫大豆MON87701品系特异基因序列设计引物和Taqman探针,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行检测。结果表明,本研究设计的引物和探针具有很好的品系鉴定特异性,检测灵敏度可达到0.01%(m/m),检测重复性好。因此,建立的转基因大豆MON87701品系特异Taq Man实时荧光PCR检测方法可快速、准确地鉴定转基因抗虫大豆MON87701品系,可在日常检验中推广应用。