摘要：目的 建立检测HBV共价闭合环状DNA（ cccDNA）的巢式-荧光定量PCR法，检测外周血单核细胞（ PBMC）及骨髓单核细胞（MMNC）中cccDNA。方法 根据HBV cccDNA与松弛结构DNA（rcDNA）结构上的差异，设计2对跨缺口的特异性引物及下游的特异性TaqMan探针。根据Mung Bean Nuclease对rcDNA与cccDNA作用的不同，使cccDNA扩增而使rcDNA降解，分别用外引物及内引物进行PCR反应，再用荧光探针进行实时荧光定量PCR，根据阳性参照物，计算出检测标本定量值。结果 成功建立了HBV cccDNA巢式-荧光定量PCR的检测方法，线性范围为5.0× 10２～3.9×107拷贝/ml。用上述方法检测25例慢乙肝及肝硬化血清HBV DNA阳性患者外周血单核细胞中cccDNA，7例骨髓单核细胞中cccDNA，21例健康献血者外周血单核细胞中cccDNA，骨髓标本中有3例cccDNA阳性，25例外周血标本中有9例cccDNA阳性。结论 巢式-荧光定量PCR法可检测乙肝患者PBMC及MMNC中的HBVcccDNA含量。PBMC及MMNC中可检测到HBVcccDNA.

摘要：目的建立检测HBV共价闭合环状(cccDNA)的巢式-荧光定量PCR法,检测外周血单核细胞(PBMC)及骨髓单核细胞(MMNC)中cccDNA。方法根据HBV cccDNA与松弛结构DNA(rcDNA)结构上的差异,设计2对跨缺口的特异性引物及下游的特异性TaqMan探针。根据Mung Bean Nuclease对rcDNA与cccDNA作用的不同,使cccDNA扩增而使rcDNA降解,分别用外引物及内引物进行PCR反应,再用荧光探针进行实时荧光定量PCR,根据阳性参照物,计算出检测标本定量值。结果成功建立了HBV cccDNA巢式-荧光定量PCR的检测方法,线性范围为5.0×102～3.9×107拷贝/ml。用上述方法检测25例慢性乙型肝炎(CHB)及肝硬化血清HBV DNA阳性患者PBMC中cccDNA,7例MMNC中cccDNA,21例健康献血者PBMC cccDNA,骨髓标本中有3例cccDNA阳性,25例外周血标本中有9例cccDNA阳性。结论巢式-荧光定量PCR法可检测乙型肝炎患者PBMC及MMNC中的HBV cccDNA含量。PBMC及MMNC中可检测到HBV cccDNA。

摘要：采暖火墙的设计吉林省永吉县能源办李云鹏，代俊英随着人民生活水平的提高，我国的北方家庭逐步拆除火坑，利用家用土暖气和火墙进行取暖．那么采暖火墙的设计有哪些要求呢？一、火场的技术要求１．火墙一般要靠近窗、外门，以便直接加热从门和窗进人的冷空气。同时还要考...