摘要：背景:许旺细胞作为周围神经损伤修复的重要桥接材料,其活性对临床修复周围神经损伤成功与否具有重要影响。目的:观察不同维持温度冷冻预处理超深低温保存对胎兔许旺细胞活性的影响。方法:设计胎兔许旺细胞冷冻维持温度为-30～-70℃,每间隔-5℃为一组,以10%二甲基亚砜为低温保护剂,对胎兔许旺细胞进行上述温度冷冻预处理,液氮中保存48h,快速复温后继续培养48h,透射电镜观察细胞超微结构改变,MTT法和3H-TdR掺入法检测细胞活性。结果与结论:透射电镜下见-45℃处理的细胞超微结构良好,其余各温度组细胞均出现细胞器肿胀、坏死等轻重不同的冷冻损伤表现。MTT法和3H-TdR检测结果均显示-45℃冷冻预处理对许旺细胞的生长抑制率最低,分别为(3.83±0.56)%、(4.41±0.71)%,和其余各温度组之间相比,差异有显著性意义(P<0.05)。提示-45℃是胎兔许旺细胞冷冻预处理的最佳维持温度值,对细胞活性影响最小,可较好保持其生物学活性。

摘要：目的探讨不同维持温度冷冻预处理超深低温保存对胎兔许旺细胞免疫原性的影响。方法设未冷冻处理细胞为对照组,实验组细胞设计冷冻维持温度为-30℃,-35℃,-40℃,-45℃,-50℃,-55℃,-60℃,-65℃,-70℃,10%二甲基亚砜(DMSO)为低温保护剂,对胎兔许旺细胞进行冷冻预处理,液氮中保存48h,复温,培养48h后培养液中加入IFN-γ(100U/ml)继续培养72h,流式细胞仪检测许旺细胞MHC-Ⅱ分子的表达率。结果流式细胞仪检测显示各实验组-30℃至-70℃许旺细胞MHC-Ⅱ分子的表达率依次分别是:7.59±0.91,10.43±0.90,14.35±0.73,16.80±0.73,15.41±0.71,14.50±0.73,10.92±0.89,8.36±0.68和5.26±0.76,对照组为35.98±1.06,统计学显示实验组MHC-Ⅱ表达率和对照组之间有显著性差异(P<0.01)。结论不同维持温度冷冻预处理超深低温保存能降低胎兔许旺细胞的免疫原性。