摘要：松花粉是指松科植物马尾松、油松或同属数种植物的干燥花粉,但不同树种来源的松花粉在活性成分的含量上有所差别。因此,准确鉴定松花粉的树种来源对保证松花粉产品质量的稳定性、规范松花粉市场具有重要意义。针对传统性状及化学法在检测松花粉原料的树种来源上的局限性,通过比较不同松树树种的叶绿体基因组序列,在accD基因中挖掘了马尾松和云南松的单核苷酸多态性位点。根据其特异性位点,通过人为引入错配碱基的方式分别设计了马尾松和云南松的特异性引物,并利用多重PCR对不同松树的花粉进行了鉴定。除了松树的特征性条带外,马尾松和云南松的花粉样品还分别产生了168 bp和342 bp的特异性条带。实验建立的多重PCR方法不仅可以将活性成分含量较高的马尾松、云南松的花粉与其他松树花粉及混淆品蒲黄区分,而且可以鉴定市售松花粉产品的原料来源。结果表明,采用叶绿体基因可以对花粉的DNA进行扩增并实现对花粉来源的鉴定。该方法可以作为松花粉原料来源的鉴定体系,保证松花粉产品质量的稳定性,也为松花粉及产品质量的检测标准的完善和补充提供了新的DNA分子标记手段。

摘要：目的:开发一种能够准确鉴别山豆根药材的DNA分子标记方法,以保障山豆根临床用药的安全性和有效性。方法:在核糖体内转录间隔区挖掘山豆根及其混伪品的DNA多态性序列,分别设计山豆根及其混伪品的物种特异性引物,建立可用于区分山豆根及其5种混伪品的多重PCR体系。结果:该多重PCR体系不仅可以在一次反应中准确地实现山豆根及其5种混伪品的分子区别和鉴定,而且还可以检测山豆根中1%的掺伪品,DNA检测限低至0.1 ng。结论:与传统的性状鉴别、显微鉴别及理化鉴别方法相比,该研究所建立的山豆根DNA分子标记鉴定方法稳定性好、准确度高、特异性强,可以有效地解决市场上山豆根药材的植物来源复杂、混伪品难以鉴别的问题。

摘要：利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术扩增新西兰柔鱼和北太平洋柔鱼的线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(cytochrome C oxidase subunitⅠ,COⅠ)基因,通过多重序列比对检测2种鱿鱼之间的多态性位点。根据2种鱿鱼的特异性位点分别设计2种鱿鱼的品种特异性引物,并利用多重PCR实现2种鱿鱼品种的特异性鉴定和区分。结果表明:建立的品种特异性PCR鉴别体系对新西兰柔鱼和北太平洋柔鱼分别扩增出214 bp和339 bp的品种特异性条带,该方法的检测限低至0.1 ng,且能检测出新西兰柔鱼中1%的北太平洋柔鱼掺入,并能有效检测市场上2种鱿鱼及其复配鱼糜制品的原料来源。