摘要：一、让学生敢于质疑提问什么是有价值有效的课堂,我观摩了不少优质课,乍一看无懈可击,设计好重难点教学过程,一步步地拽着学生往里走,最终顺利完成任务。程序化的课堂中学生毫无主动权可言,即使让学生提问题也都是一些形式上的问题,无法调动学生的学习主动性。真正的生本课堂,必须要让学生提出问题,要让学生去讲解他会的内容。

摘要：目的:克隆反义微小RNA hsa-miR-21并构建其慢病毒表达载体,观察反义寡核苷酸重组慢病毒(ASO-miR-21)对喉癌细胞增殖的调控作用。方法:针对hsa-miR-21核苷酸序列,设计并合成mir-21反义寡核苷酸,将pGCSIL-GFP Vector经双酶切后连接产生pGCSIL-GFP-miR-21慢病毒表达载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。pGC-LV-miR-21、pHelper 1.0和pHelper 2.0质粒共转染细胞293T,包装慢病毒。以293T细胞绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的表达水平测定病毒滴度。采用MTT法及克隆形成实验检测反义miR-21(ASO-miR-21)重组慢病毒对喉癌细胞增殖能力的影响。结果:成功构建反义hsa-miR-21的慢病毒表达载体,采用ASO-miR-21抑制喉癌细胞内高水平表达miR-21的活性后,可显著抑制喉癌细胞增殖。结论:成功构建反义miR-21的慢病毒表达载体,ASO-miR-21可以明显抑制喉癌细胞增殖。