摘要：目的设计、合成及筛选光老化相关基因—转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)小分子干扰RNA(siRNA),了解基因调控效果,用以探索皮肤抗衰老基因治疗可能的新途径。方法应用RNA设计软件,设计并合成针对小鼠TGF-β1 mRNA的3对21核苷酸siRNA,转染小鼠成纤维细胞,检测转染效率及细胞活性;分别在基因和蛋白水平检测TGF-β1表达。结果 TGF-β1基因siRNA工作浓度为150nmol/L,Lipofectamine2000脂质体4μL/孔(24孔板)时转染率最高(84.0%。综合考虑转染率与细胞活性,选用0.5μL/孔(转染率为72.4%。与对照组相比,转染TGF-β1 siRNA的小鼠皮肤成纤维细胞TGF-β1表达下调,其差异有统计学意义(P<0.05),以siRNA-S1最显著,基因水平抑制率达96.9%,蛋白水平抑制率达62.0%。结论:TGF-β1siRNA转染小鼠成纤维细胞最佳条件是Lipofectamine2000脂质体0.5μL/孔,siRNA-S1有效抑制TGF-β1蛋白表达时间可达72h。

摘要：基于连续体ICM拓扑优化方法,笔者提出了不在体积约束下的多阶频率加权和为目标函数,考虑非设计集合的拓扑优化方法。在CAD/CAE设计系统中,针对高速立式加工中心的动态特点,确定加工中心的关键结构件立柱为优化对象,并考虑其它重要零件影响。根据此方法设计的高速立式加工中心立柱,使得整机动态特性有很大提高。