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磷酸三酯酶突变体H23A的真核表达及性质表征: 收藏
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引用; 《食品科学》2013年第23期34卷 250-255页; 作者：詹冬玲任玉雪李克剑闵伟红刘洋张英文刘景圣吉林农业大学食品科学与工程学院吉林长春130118 中油吉化集团总医院药剂科吉林吉林132022 吉林化工学院化学与制药工程学院吉林吉林132022; 通过同源序列比对和晶体结构分析,嗜热菌Geobacillus kaustophilusHTA426磷酸三酯酶的H23位点高度保守,并且位于金属离子结合位点附近。结合Rosseta design程序设计,本实验将突变体H23A在毕赤酵母GS115中高效表达。通过组氨酸标签镍柱...; 通过同源序列比对和晶体结构分析,嗜热菌Geobacillus kaustophilusHTA426磷酸三酯酶的H23位点高度保守,并且位于金属离子结合位点附近。结合Rosseta design程序设计,本实验将突变体H23A在毕赤酵母GS115中高效表达。通过组氨酸标签镍柱分离纯化、非变性蛋白电泳和Western blotting鉴定表达产物,证明该突变体酶主要是以介于单体和二聚体之间的寡聚形式存在。初步酶学性质研究表明,突变体酶是别构酶,V max为92.45U/mg,Hill系数h为1.98;最适温度为70℃,最适pH值为10.0;70℃的热稳定性良好,半衰期为5.1h,而且大多数二价金属离子对突变体H23A都有激活作用。; 来源：详细信息评论

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