摘要：目的:设计并表达预防16型人乳头瘤病毒感染的重组蛋白疫苗。方法:选取HPV16型病毒L1蛋白上的B表位和T表位,将其连接组合成多种方式,利用计算机预测蛋白质的三维结构,选取其中最优的结构进行基因克隆构建,并利用杆状昆虫系统进行表达。结果:利用计算机设计出了一种重组蛋白,成功构建了该重组蛋白的结构基因,并在杆状昆虫表达系统中得到表达。结论:成功构建并表达了人乳头瘤病毒的重组蛋白疫苗。

摘要：ABAQUS软件拥有强大的非线性功能,在复杂高层建筑动力弹塑性分析方面具有显著的优势,但其前处理繁琐复杂。为提高建模效率,本文采用参数化建模的方法,研发了由PKPM的计算模型生成ABAQUS CAE模型的参数化建模程序(PA-TRANS)。详细阐述了材料、构件、配筋、荷载、边界条件等模型创建的关键技术。利用两个实际复杂高层工程实例对研发的模型转换程序的准确性进行了验证,为接下来的复杂高层建筑结构进行弹塑性分析提供了技术条件。

摘要：建立并优化犬特异性寡脱氧核苷酸(CpGODN)的体外筛选条件,筛选自行设计的对犬具有免疫刺激活性的CpGODN。用CpGODN2006对犬的免疫细胞进行刺激,测定细胞增殖能力。对免疫细胞的来源、细胞铺板浓度、CpGODN的刺激时间和浓度及增值能力的测定方法等条件进行优化。并对自行设计的CpGODN进行了初步筛选。结果显示,犬脾细胞对CpGODN的反应性比外周血单个核细胞好。在犬脾细胞为6×105个/孔,37℃5%CO2条件下,经10mg/LCpGODN2006刺激48h,使脾细胞明显增生。3H-TdR掺入法测得的结果比MTT法更敏感。自行设计的CpGODNR008能显著地刺激犬脾细胞增生,且优于CpGODN2006(P<0.05)。结果表明,优化了犬特异性CpGODN的体外筛选条件,并筛选出了对犬具有免疫刺激活性的CpGODN。

摘要：为研制安全高效的口蹄疫疫苗,设计并构建了能模拟口蹄疫病毒天然表位的重组蛋白疫苗.选取牛O型口蹄疫病毒Vp1蛋白上的B表位和T表位,将其连接组合成多种方式,利用计算机预测蛋白质的3维结构,选取其中最优的结构进行构建.在大肠杆菌表达后经镍亲和层析纯化重组蛋白.重组蛋白免疫豚鼠后,经ELISA实验检测血清中抗FMDV抗体水平.构建了牛O型口蹄疫病毒重组蛋白疫苗的结构基因,并成功表达和纯化了该重组蛋白.功能实验表明,该蛋白在豚鼠体内诱生了高水平的抗牛O型口蹄疫病毒的抗体.该重组蛋白疫苗的设计为研制牛O型口蹄疫病毒新型疫苗提供了新的思路.

摘要：目的对小鼠重复给予CpG684-狂犬疫苗，考察该新型疫苗的非临床安全性，为临床设计人用剂量及临床毒副反应的监测提供参考依据。方法使用BALB／c小鼠，分为5组：溶媒对照组、狂犬疫苗对照组、（2．5μg CpG684＋1／4狂犬疫苗）·只“组、（5μg CpG684＋1／4狂犬疫苗）·只“组和（15μgCpG684＋1／4狂犬疫苗）·只。组。肌肉注射给药，在第0、3、7、14、28、42天各给药1次，实验期间观察动物的临床症状、注射部位刺激性，测定体重、摄食量，进行抗狂犬病毒抗体和抗体亚型IgG2a检测；末次给药后1d、3周分别进行血液学和血清生化测定，分别对每组部分动物进行剖检、脏器称取质量，并采集组织样本进行组织病理学检查。结果狂犬疫苗本身和CpG684-狂犬疫苗各剂量在第4～6次给药后使小鼠产生严重过敏反应。各剂量CpG684-狂犬疫苗在末次给药后引起雌、雄小鼠单核细胞数量增加及雌性小鼠血小板减少，高剂量CpG684-狂犬疫苗还引起雄性小鼠血小板减少；高剂量CpG684-狂犬疫苗引起雌、雄小鼠血清总胆固醇（CHO）增加；狂犬疫苗和中、高剂量CpG684-狂犬疫苗引起小鼠血清碱性磷酸酶（ALP）水平降低，以上改变在停药后3周均恢复。单独狂犬疫苗和各剂量CpG684-狂犬疫苗均引起雌、雄小鼠血清球蛋白增加、A／G比值降低，停药后3周未恢复。给予单独狂犬疫苗和各剂量CpG684-狂犬疫苗均引起小鼠脾脏质量增加，停药后3周有-定的恢复。与疫苗相关的组织病理学改变为脾脏白髓增生和白髓生发中心易染体巨噬细胞数目增多，以及注射肌肉局部显著炎症反应和纤维组织增生，停药后3周除高剂量组外，其他组均能较好恢复。结论狂犬疫苗和CpG684．狂犬疫苗引起小鼠严重过敏反应、血清球蛋白和脾脏质量增加、ALP降低，CpG684-狂犬疫苗引起小鼠血小板减少、单核细胞数量和血清CHO增加。与疫苗相关的组织病理学改变为脾脏白髓增生和白髓生发中心易染体巨噬细胞数目增多，以及注射肌肉局部显著炎症反应和纤维组织增生。停药后3周上述变化多数能较好恢复。