摘要：泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin-proteasome pathway)是具有高度选择性的蛋白质降解途径,该途径对细胞内蛋白的选择性降解起着重要作用。本研究根据GenBank已登录的真核生物泛素(ubiquitin)编码框的氨基酸序列,设计一对简并引物,RT-PCR克隆了家蝇Musca domestica泛素基因的编码区cDNA序列,并进行了测序。序列分析表明,该编码区的长度为228bp,编码76个氨基酸,命名为Mdubi,GenBank登录号为DQ115796。同源性比较发现,Mdubi氨基酸序列与其他真核生物泛素编码框同源性可达94%以上。RT-PCR检测表明,Mdubi在家蝇不同组织中均高效表达,且不受大肠杆菌Escherichia coli刺激的影响,是遍在性表达。为进一步研究Mdubi的结构和功能,将Mdubi克隆到原核表达载体pQE30上,构建重组质粒pQE30-UBI,转化大肠杆菌M15感受态细胞,在IPTG诱导下进行了高效表达,SDS-PAGE检测表明Mdubi在大肠杆菌中可表达相对分子质量为9.6kD的可溶性融合蛋白;Western blot分析表明表达产物能与Ni-NTA鏊合物特异性的结合,表明表达的Mdubi为N端带有6His标签的融合蛋白。利用Ni2+-NTA亲和柱一步纯化了Mdubi,以该融合蛋白免疫新西兰大白兔制备了抗Mdubi血清。本研究成功克隆了家蝇泛素的编码序列,并在原核细胞中得到了表达,为进一步研究泛素在家蝇体内的作用机制奠定了基础。

摘要：沙面部分文物建筑因历史原因,如何"修旧如旧"是一项十分复杂的技术工作。本阐述项目监理方针对文物建筑修缮工程特点,通过积极参与前期摸查及修缮计划研讨,修缮工程实施阶段在施工人员素质、原材料质量、高效动态设计、坚持传统施工工艺、现场文明施工、安全防火、文物修缮档案资料等方面全方位监理控制,最终达到"追求最大程度的还原"工程目的。文物建筑由于本身的特殊性和复杂性,国家至今仍未有一套系统的、完整的、可操作的施工、验收规范,因此文物建筑修缮必须全过程在文物专家监督下进行。作为参与文物修缮的监理工作者,我们希望国家权威文物主管部门尽快对文物保护工程理论作进一步细化解释。