摘要：原核表达猪盖他病毒(Getah virus)衣壳蛋白(Cap)并制备多克隆抗体。设计一对特异性引物,从含有Cap基因的pT-Cap质粒中扩增全长Cap基因,克隆至携带有His标签的原核表达载体pColdⅠ中,通过PCR、酶切鉴定和序列测定后,重组质粒pCold-Cap转化大肠杆菌Rosetta 2,IPTG诱导后SDS-PAGE和Western blot鉴定融合蛋白;蛋白经镍柱纯化后切胶免疫Balb/c小鼠,制备多克隆抗体。实验表明:经终浓度0.1mmol/L IPTG 15℃诱导24h后,Cap基因在Rosetta 2中获得高效表达,表达量占菌体蛋白的40.2%,SDS-PAGE显示融合蛋白相对分子质量为32.3kD。Western blot显示制备的鼠源抗血清可以与融合蛋白发生反应,有明显的特异性条带。猪盖他病毒衣壳蛋白原核表达成功,制备的多抗可以识别Cap蛋白。

摘要：根据GenBank中的猪源抗病毒蛋白Mx1基因(poMx1)序列设计1对特异性引物,从Mx1基因全长片段中扩增和克隆了特异性的115 bp核苷酸片段。测序鉴定正确后将重组质粒进行定量并10倍倍比稀释作为扩增模板,通过SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,建立Mx1的标准曲线及回归方程。结果显示:该标准曲线的回归方程为Y=-2.986 3 lg X+38.239 3(R2=0.998 5),灵敏度为1×102μL-1;应用该方法对猪瘟兔化弱毒苗接种猪肾细胞(PK-15)后产生的poMx1 mRNA进行定量分析,发现病毒感染细胞4 h后,poMx1的表达量最高(P<0.01),然后随着时间的增加而缓慢减少。结论:建立的SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR方法可以检测poMx1 mRNA的表达水平。

摘要：根据猪瘟病毒衣壳蛋白(Core)基因序列设计一对特异性引物,RT-PCR从猪瘟兔化弱毒中扩增出完整的Core基因,经酶切和序列测定后,克隆到携带His标签的原核表达载体p ColdⅠ中,成功构建了重组质粒p Cold-Core,并转化到大肠杆菌Rosseta 2(R2)中;利用IPTG诱导表达目的蛋白并鉴定表达效果。结果表明:经终浓度为0.1 mmol/L IPTG诱导24 h后,Core基因在R2中获得分泌性可溶表达,表达量占菌体蛋白的32.6%,SDS-PAGE显示目的蛋白相对分子质量为20 ku。Western blot结果显示Core蛋白可以分别与His单抗和猪瘟病毒阳性抗血清发生特异性反应,均出现单一反应带。将目的蛋白切胶后免疫Balb/c小鼠,制备特异性抗血清,Western blot结果显示该抗血清与衣壳蛋白反应后有明显的特异性条带,经激光共聚焦鉴定抗血清能够与胞浆中的猪瘟病毒粒子发生反应。结果表明,Core基因表达成功,制备的抗血清具有生物学功能。本研究为深入探讨Core蛋白在猪瘟病毒致病机制上的作用奠定了基础。

摘要：随着网络技术的发展,在线教育的作用价值逐渐呈现,优化在线教育交互方式是保障在线教学质量的有效途径,基于在线教育中教师授课方式的转变以及师生交互形式转变等问题的思考,本文在ADDIE模型的指导下提出了网络直播支持在线教学模式,分析了当前的在线教学和在线教育交互设计方面存在的诸多问题,从交互设计理念视角提出了对未来在线教育交互设计的优化方案,并以护理信息学课程为例进行在线教学实践探索,为其它在线课程提供参考,以期建设更优质的在线教学资源。

摘要：我国英语学习者往往在听力训练中面临诸多困难。将这些困难进行准确的归纳与量化分析不仅有助于理论发展,且具有较强的实践意义。为了加深并细化对于我国非熟练英语学习者听力练习困难的理解,研究以非对称模型为理论基础,着重关注母语干扰对实际听力训练的影响,试图引入听力启动词汇选择任务(包括类别判断任务),设计测试方法,以准确测试英语学习者在单词听力中直接通达概念的能力。

摘要：随着社会经济的快速发展,我国的科学技术水平有了很大的提升,这也为人们的生活带来了巨大改变,生活方式、理念、精神等方面均受到了影响。人们在日常的生产与生活中,为了某些利益而破坏了自然环境,损坏了生态平衡,对自然资源的消耗也逐渐增多;而逐渐恶略的生态环境引发了人们对自然环境的思考,考虑要采用何种生活方式、生产方式、理念等才能降低对自然的破坏。环境艺术设计就是将人与自然和谐、统一的有效结合起来,实现人与自然的协调相处,让人认识到不仅要重视与家庭、个人、社会的联系,还要注重与自然的交流。本文主要针对环境艺术设计中存在的问题展开了探讨,以及对生态理念在环境艺术中的应用进行了分析,供大家参考。

摘要：随着现代社会的不断发展,各式各样的企业层出不穷,在这竞争激烈的社会中,一个企业想要能够提升自身的竞争力,就必须得在保证产品质量的情况下,降低产品的成本是重中之重,在这其中产品设计中的成本控制就是首先需要考虑到的。本文通过对一家生产汽车模具公司的产品设计控制进行分析,找出其中产品设计的成本控制中存在的问题,再进行分析,希望能够帮助各大企业做好产品设计成本的控制。