摘要：背景:儿茶素具有强抗氧化活性已成共识,但其对免疫调节作用报道甚少;同时,儿茶素存在不稳定性及脂溶性差等缺陷,微胶囊技术是解决这一问题的一种有效途径。目的:观察微囊化儿茶素与儿茶素对环磷酰胺致免疫低下小鼠特异性细胞免疫、特异性体液免疫、非特异性体液免疫及胸腺与脾脏脏器系数的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-11/12在中南大学湘雅二医院医学实验动物中心完成。材料:安化小叶种儿茶素由湖南金农生物资源股份有限公司提供;儿茶素的微囊化由中南大学湘雅二医院小儿肾脏病研究室完成。环磷酰胺由上海华联制药有限公司生产。方法:600只昆明种小鼠随机分生理盐水组,儿茶素500,250,125mg/kg组,乙基纤维素500,250,125mg/kg组;微胶囊化儿茶素500,250,125mg/kg组,环磷酰胺组,环磷酰胺+微胶囊化儿茶素500,250,125mg/kg组,环磷酰胺+儿茶素500,250,125mg/kg组;环磷酰胺+乙基纤维素500,250,125mg/kg组共20组。生理盐水、儿茶素、乙基纤维素、微胶囊化儿茶素均灌胃给药,连续给药14d;环磷酰胺自第11天起腹腔注射给药80mg/kg,连续4d。主要观察指标:利用小鼠迟发型超敏反应测定特异性细胞免疫功能,血清溶血素实验测定特异性体液免疫功能,小鼠碳粒廓清指数测定非特异性体液免疫功能以及脾指数与胸腺指数衡量机体免疫功能。结果:与生理盐水组比较,微胶囊化儿茶素与儿茶素500,250mg/kg组的耳肿胀度明显增加;微胶囊化儿茶素500,250,125mg/kg组半数溶血值、碳粒廓清指数和吞噬指数、脾指数、胸腺指数均明显增高(P<0.01,P<0.05);儿茶素500mg/kg组小鼠的半数溶血值有一定的提高,儿茶素500,250,125mg/kg组小鼠的碳粒廓清指数和吞噬指数、脾指数、胸腺指数均明显提高(P<0.05,P<0.01)。与环磷酰胺模型组小鼠比较,环磷酰胺+儿茶素500,250mg/kg组及环磷酰胺+微胶囊化儿茶素500,250mg/kg组小鼠耳片肿胀度、半数溶血值、碳粒廓清指数、吞噬指数、脾指数、胸腺指数均显著增加(P<0.05,P<0.01)。各微胶囊化儿茶素组耳片肿胀度、半数溶血值、小鼠脾指数、胸腺指数、碳粒廓清指数和吞噬指数均高于其对应的儿茶素组。结论:儿茶素可显著提高正常小鼠及环磷酰胺致免疫低下型小鼠的特异性细胞免疫、特异性体液免疫、非特异性体液免疫、胸腺与脾脏的脏器系数,微囊化儿茶素效应强于游离儿茶素。

摘要：背景:儿茶素是一种抗氧化能力很强的天然植物抗氧化剂,因其稳定性较差且生物利用率较低,需对剂型加以改进以提高其效能。目的:研究儿茶素微胶囊对肾病综合征大鼠肾功能的影响。设计:随机对照研究。单位:湖南农业大学生化与发酵工程实验室和中南大学湘雅二医院小儿肾病研究室。材料:实验在上述两单位的实验室完成。选取6周龄体质量相近(180～220g)的SD雌性大鼠120只,随机分成对照组、肾病组、激素治疗组、VitE治疗组、儿茶素治疗组、儿茶素微胶囊治疗组,每组20只。方法:实验第1天对照组尾静脉1次注射0.1mL生理盐水,其他各组尾静脉1次注射阿霉素(5mg/kg)。激素治疗组自实验第2周末皮下注射地塞米松犤1.8mg/(kg·d)犦至第6周末实验结束。VitE治疗组自实验第2周末行最大剂量维生素E灌胃犤50mg/(kg·d)犦至第6周末实验结束。儿茶素治疗组自实验第2周末行儿茶素灌胃犤50mg/(kg·d)犦至第6周末实验结束。儿茶素微胶囊治疗组自实验第2周末行儿茶素微胶囊灌胃犤50mg/(kg·d)犦至第6周末实验结束。应用考马斯亮蓝法测定不同时期24h尿蛋白排泄量,采用半定量评分法分别对肾小球、肾小管间质的病理改变进行计分评价。主要观察指标:大鼠24h尿蛋白排泄量和肾脏病理积分。结果:实验末,24h尿蛋白的排泄量依次为:肾病组>

摘要：背景:干细胞移植为慢性肾脏病的治疗提供了新的视角,特异性标记干细胞并体内示踪是这一领域研究的基础,目前尚无一种公认的适用于所有细胞的标记方法。目的:观察DAPI及绿色荧光蛋白标记细胞在阿霉素肾病大鼠体内的定位及分化,探讨便捷的大鼠胚胎后肾间充质细胞的体外标记方法。设计、时间及地点:分组对比观察,于2007-04/12在中南大学湘雅二医院完成。材料:清洁级雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠60只,体质量180～220g,用于制备阿霉素肾病大鼠模型。方法:分别将DAPI、DAPI体外标记后肾间充质细胞、绿色荧光蛋白体外标记后肾间充质细胞,通过尾静脉注入阿霉素肾病大鼠体内;于细胞移植后1,3,5周行肾组织冰冻切片,观察DAPI及绿色荧光蛋白荧光分布,并ABC免疫酶染色法检测肾组织中绿色荧光蛋白表达。主要观察指标:比较DAPI及绿色荧光蛋白两种不同方法标记后肾间充质细胞在阿霉素慢性肾病大鼠肾内的定植情况,以及绿色荧光蛋白标记细胞不同时间点移植在肾内的定植改变。结果:①DAPI标记细胞及单纯DAPI尾静脉注射后1周,均可在肾小管上皮细胞中观察到DAPI阳性细胞,至移植后5周仍可观察到,但随时间延长荧光有减弱趋势。②绿色荧光蛋白标记细胞移植后1周,可在肾小管上皮细胞中观察到绿色荧光蛋白阳性细胞,至移植后5周仍可观察到,荧光无明显减弱。③ABC免疫酶染色法检测,显示绿色荧光蛋白阳性细胞主要表达于近端肾小管中,肾小球系膜区亦可观察到少量表达;绿色荧光蛋白阳性产物主要表达于胞浆。绿色荧光蛋白表达半定量评分显示,标记细胞的早期应用阳性率大于晚期应用者,且随观察时间延长,阳性率有升高趋势。结论:后肾间充质细胞的脂质体感染法绿色荧光蛋白标记是一便捷、有效的体外标记、示踪方法,适于移植细胞的短期内示踪、观察。

摘要：目的分析儿童急性肾损伤的临床特征,探讨生物标记物对儿童AKI的诊断价值。方法选取2016年6月~2017年3月在我院儿科和中南大学湘雅二医院儿童医学中心肾内科住院的患儿60例作为研究对象,按照AKIN标准分为AKI组(30例)和非AKI组(30例),选取同期同年龄段健康体健儿童24例作为对照组。分析AKI患儿临床特征及影响因素,观察不同组患儿尿及血清中生物标记物水平,比较不同生物标记物对AKI的诊断价值。结果引起AKI的常见疾病分别为脓毒症、药物中毒、重症过敏性紫癜和蛇咬伤。身高和体重与AKI发生有较高的相关性(P<0.05)。入院后2 h,除SCr外,两组患儿的尿KIM-1、NGAL、L-FABPs、血清Cys C及NGAL水平比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。入院后48 h,两组患儿的SCr水平比较,差异有统计学意义(P<0.01);AKI组其他各项指标水平较之前下降,但仍高于非AKI组,差异均有统计学意义(P<0.01)。入院2 h,尿KIM-1、NGAL、L-FABP、血清Cys C、NGAL及SCr诊断AKI的AUC分别为0.912、0.922、0.909、0.906、0.943和0.533。入院48 h,尿KIM-1、NGAL、L-FABP、血清Cys C、NGAL及SCr诊断AKI的AUC分别为0.887、0.904、0.858、0.818、0.889和0.942。结论AKI与疾病严重程度有关。在肾脏病变的情况下,身高和体重可能是AKI发生的影响因素。血NGAL对AKI的早期临床诊断可能具有较好的参考价值,SCr仍不失为预测AKI的一项重要指标。

摘要：目的 应用Meta分析方法对国内、外已发表和未发表的有关儿童过敏性紫癜（HSP）早期应用糖皮质激素（GC）预防肾损害的RCT进行综合定量分析，为GC早期应用降低儿童HSP肾损害的发生率提供参考依据。方法 以过敏性紫癜（Henoch—Schonlein purpura／HSP），紫癜性肾炎（Anaphylactoid purpura），紫癜肾炎（Henoeh—Schonlein purpura nephritis／HSPN），糖皮质激素（glueocorticoid，steroid），泼尼松（predonisone），甲泼尼龙（methypredonisolone），地塞米松（dexamethasone）等为主题词，通过电子检索MEDLINE（1963～2006．3）、OVID数据库（1993～2006．3）、Springer数据库（1994～2006．3）和中国期刊全文数据库（1994～2006．3）等，同时辅以手丁检索包括会议资料和学位论文。尽可能全面地收集GC早期应用治疗儿童HSP的RCT，对符合要求的文献进行质量评估，用Rev Man4．2软件对结果进行合并统计分析，计算治疗组相对于对照组的肾损害危除的优势比（odds ratio，OR），评价GC早期应用是否能预防儿童HSP肾损害。结果 本次评价中共纳入4篇RCT。总样本量为359例，其中GC治疗组178例，出现肾损害15例；对照组181例，出现肾损害36例，差异有统计学意义。GC早期应用有利于减少肾损害的发生，合并OR=0．36，95％CI：0．19～0．69。结论 与对照组相比，GC早期应用仅显示有能够预防儿童HSP肾损害的趋势。HSP一经诊断，或最迟不超过出现症状后3周内，口服泼尼松1～2mg·kg^-1·d^-1，疗程为2～3周，能够减少肾损害的发生率。可靠结论尚需大样本、多中心、设计良好的RCT进一步验证。

摘要：目的通过构建维生素D受体(VDR)基因特异性siRNA(small interfering RNA)真核表达载体,检测其对血管内皮细胞(EC)中VDR基因的沉默作用,为进一步探讨VDR与心血管疾病发生发展关系的研究奠定基础。方法构建小鼠VDR特异性siRNA表达载体并测序,进行人EC/鼠EC的培养,进行siRNA转染试验,倒置荧光显微镜下观察细胞转染效率,Western blot进行鉴定。结果针对VDR基因的4个不同位点,设计、构建了4个siRNA干扰载体,经测序,序列全部正确。成功完成了人EC/鼠EC的培养及转染,荧光显微镜观察发现转染的重组质粒在EC内出现不同的转染效率,1号质粒的转染效率约为65%,2号质粒的转染效率约为50%,3、4号质粒的转染效率比较低。取转染效率较高的1、2号质粒做进一步转染干预,转染72h后,采用Western blot方法检测人EC/鼠EC内VDR蛋白质表达,与空白对照组比较1,、2号质粒在人EC中对VDR的表达无明显抑制作用,而在鼠EC中则有明显抑制作用,其中以1号质粒抑制效果最为明显,目的蛋白IOD/内参蛋白IOD比值发现两干扰组在人EC中对VDR的表达无明显抑制作用,而在鼠EC中则有明显抑制作用,其中以1号干扰质粒抑制效果最明显,抑制率达到了70%。结论成功完成了人EC/鼠EC的培养、转染及转染干预,并行Western blot鉴定,发现抑制效率明显的为鼠EC 1号质粒组。表明针对鼠VDR基因的siRNA表达载体有很强的特异性,并且对VDR基因干扰的位点不同表现的抑制效应不一。