摘要：根据GenBank中边缘无浆体的MSP4基因序列(EU677383)设计2对引物(AmspF3/R3和Am-spF4/R4)并克隆MSP4部分基因,构建含有MSP4基因的标准质粒,以AmspF3/R3为引物进行荧光定量PCR,建立了边缘无浆体的MSP4SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法,并用于临床血样检测。结果显示,该方法可以检测到1×102 copies/μL的标准质粒DNA,该方法对绵羊无浆体、附红细胞体、东方巴贝斯虫、组织滴虫提取的DNA均为阴性反应。结果表明,该方法与常规PCR方法比较,阳性及阴性符合率都为100%,且具有敏感、重复性好、无污染特性,并具有能准确定量的特点,说明该方法具有很好的应用前景和研究价值。

摘要：用原虫16S rRNA基因序列通用引物对湖南5个地区牛无浆体感染的阳性血液样品进行PCR扩增,经测序和序列拼接,获得5个无浆体样品16S rRNA基因的部分序列,应用分子生物学软件进行分析,并根据所获得序列的保守区间设计特异性引物,进行PCR诊断方法的探讨性研究。结果表明,在通用引物下,5个地区无浆体感染的阳性血液样品均获得1425bp大小的虫体16S rRNA基因条带;测序后5个无浆体16S rRNA序列同源性均在97%～98%。证明5个分离虫株初步鉴定为牛边缘无浆体。

摘要：2019年1月中旬,常规血清学监测显示湖北某伪狂犬病阴性猪场有转阳迹象,经朔源为一次外购精液所引起,立即淘汰疑似阳性公猪,并对全群公母猪普免某上市公司伪狂犬病变异毒株疫苗。1月下旬,猪场出现临床症状,母猪流产,新生仔猪有神经症状及死亡,对死亡小猪及流产胎儿胎衣进行病原检测,确诊为伪狂犬病病毒,同时对母猪群抽取血样进行抗体监测,母猪群伪狂犬病野毒抗体全群转阳。由于伪狂犬病野毒未能及时得到控制,怀疑疫苗存在问题,因此设计检测伪狂犬病病毒gB、gC基因引物,对分离毒株及疫苗进行测序,结果显示猪场分离株为变异株,但所谓的变异疫苗毒株确为Bartha株,据目前研究数据显示,Bartha株并不能完全有效抵抗变异株。从上述现象侧面反映出目前我国伪狂犬病的防控之路将会更长,一是猪场自身管理问题,二是相关疫苗厂家存在欺骗行为,希望能引起行业的相关重视。

摘要：为找寻山羊FSH受体基因的SNP突变位点,进行FSH受体基因的多态性分析和探索该受体基因在山羊多胎中的可能作用,利用比较基因组学的方法,根据绵羊FSH受体基因序列设计引物,以湖南湘东黑山羊基因组为模板,PCR扩增了FSH受体基因5' 端侧翼调控区,通过克隆进行了序列测定及分析,并与牛、绵羊该区段序列进行了比较.结果表明,PCR扩增获得的片段为844 bp,与中国西门塔尔牛该段序列相比,同源性为94.08%,在-364 bp处的左翼发生了多碱基插入,湘东黑山羊该序列有5个碱基的插入,另在-625^-619 bp处的7个碱基缺失;与澳洲绵羊的FSHR基因比较,同源性为93.60%,在-367 bp处的左翼,湘东黑山羊该段序列有2个碱基的插入,在-630,-145,-97 bp 处各有1个碱基缺失.