摘要：目的建立检测创伤伤口分泌物中产气荚膜梭菌的实时荧光定量PCR方法,为气性坏疽的早期快速诊断提供新手段。方法以产气荚膜梭菌16SrDNA基因序列为模板,在其保守区域设计特异性引物及探针,以PCR扩增产物重组质粒作为定量检测的标准品,绘制标准曲线。对荧光定量PCR体系和反应条件进行优化,并验证方法的特异性、敏感性、重复性及临床应用的可行性。结果所建立方法检测产气荚膜梭菌具有高度特异性,与创伤弧菌等23种相关细菌均无交叉反应。检测灵敏度以纯菌计达9×102cfu/ml,相当于9cfu/反应。反应体系具有很高的稳定性。整个操作过程仅需3h。5例创伤可疑分泌物样本的荧光定量PCR检测结果与细菌培养完全一致。结论本研究建立的实时荧光定量PCR方法特异、灵敏、快速,可用于创伤伤口分泌物中产气荚膜梭菌的日常检测以及战时和突发事件时的批量应急诊断。

摘要：目的:运用实时荧光定量PCR法检测产气荚膜梭菌,为早期快速诊断气性坏疽提供新方法。方法:以产气荚膜梭菌16s rDNA基因序列为模板,在其保守区域设计特异性引物与探针,将PCR扩增所得产物片段克隆,作为定量检测的标准品,绘制标准曲线。并对荧光定量PCR体系与反应条件进行优化,验证方法的特异性、敏感性、重复性及可行性。结果:实时荧光定量PCR法对产气荚膜梭菌的检测具有高度特异性,与创伤弧菌等24种相关细菌等均无交叉反应;检测灵敏度以纯菌计数达9×102cfu/mL,相当于9 cfu/反应;反应体系有较高稳定性;整个操作过程仅需3 h;300例创伤可疑分泌物样本的荧光定量PCR检测结果与细菌培养结果一致。结论:实时荧光定量PCR法特异、灵敏、快速,适用于产气荚膜梭菌的临床检测及突发事件的批量检测。

摘要：研究了汽车覆盖件模具的工艺结构特征、分类及其加工工艺,基于PowerMILL软件环境开发了汽车覆盖件模具各种结构特征的数控加工工艺及模板,以提高NC编程的质量和效率,规范汽车覆盖件模具加工工艺路线、工艺参数等。实际应用证明了该工艺模板具有可行性和实用性。

摘要：目的：优选升红颗粒提取纯化工艺的最佳条件。方法：处方中的鸡血藤和花生红衣用水提取，提取液浓缩后醇沉纯化。设计正交试验方法，以儿茶素、总黄酮含量为评价指标，对水提取工艺条件进行考察；以儿茶素、总黄酮转移率和浸膏得率为指标对醇沉纯化工艺条件进行考察。结果：水提取的最佳工艺条件为加水量为药材量的12倍，每次提取时间为1．5h，共提取3次；醇沉纯化的最佳工艺条件为浓缩液相对密度为1．10～1．15g／ml （30℃），含醇量为70％，静置时间36h。结论：优选出的最佳工艺条件经验证其结果稳定，指标性成分含量高，可以用于投入生产。