摘要：【背景】为了提高堆肥降解有机废弃物的效率,高效堆肥菌剂成为了研究热点,其中以真菌应用的研究为多,但真菌也有对氧气和底物敏感等缺点,细菌对堆肥的作用开始被研究。本实验室以羧甲基纤维素钠(CMC-Na)为底物,从绿化废弃物堆肥中筛选得到枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis,***) BL03,它具有较好的纤维素分解能力,能提高绿化废弃物堆肥中纤维素降解和腐殖质合成的速度。【目的】进一步提高***03的纤维素酶生产能力。【方法】利用常压室温等离子(Atmospheric and room temperature plasma,ARTP)诱变BL03菌,通过CMC-刚果红固体培养基观察水解透明圈,以及液体发酵后检测酶活力的方法进行3轮筛选;通过连续多代培养观察突变株的遗传稳定性;通过梯度温度、p H培养研究突变株发酵的最适生长温度、培养基初始pH;利用正交设计方法研究适合突变株发酵培养的工业级原料配方。【结果】筛选到2株正突变株,酶活力分别提高了69%和72%;连续10代培养稳定,验证了突变株的遗传稳定性;其中酶活力最高的突变株BLA3890最适培养温度为37°C、培养基初始pH为5.0-6.5,研究得到较经济的发酵培养基配方。【结论】ARTP诱变B. subtilis BL03后得到的突变株BLA1973和BLA3890在绿化废弃物堆肥或其他纤维素降解行业具有进一步研究和应用的价值。

摘要：目的　建立一系列转基因技术和冷冻胚胎技术的实验室数据库。方法　a)显微注射法注射 186 4个1-细胞期受精卵 ,注射后存活的 12 83个胚胎进行胚胎移植 ,获得 2 0只阳性转基因动物。b)设计不同单位的激素剂量 (PMSGHCG)获得每个品系的小鼠平均排卵量和最佳激素剂量。c)采用常规法和玻璃化法进行胚胎冷冻保存 ,并就囊胚和桑椹胚两个不同时期进行复苏成活率的比较。结果和讨论　a)建立转基因技术和胚胎冷冻保存的实验数据库 (随着实验技术的不断提高还将不断的完善 )。胚胎显微注射存活率为 6 8 8% ;转基因阳性鼠出生率为16 16 % ;基因整合率为 1 5 6 %。b)激素诱发 5种品系小鼠的平均超排卵数为 :C57BL 6J(日本 ) 15 6 ;C57BL 6J 19 6 ;BDF1(日本 ) 2 1 4;C3H(日本 ) 14 8;KM 30。c)胚胎冷冻保存复苏 ,出生幼子存活率为 30 %～ 31%。