摘要：应用高效液相色谱技术对5-azaCR及MNNG处理的FL、Wish及Vero-E6细胞的DNA中5—甲基胞嘧啶(~mC)含量进行直接测量。结果表明5—aza CR(2×10^(-6)mol/L)处理细胞DNA的~mC含量较对照细胞为低(P0.05)。这与用HpaⅡ限制性片段长度放射活性分析法检测新复制DNA甲基化状态的结果一致。认为文献中关于细胞DNA低甲基化是化学致癌启动过程普遍规律的结论是由于实验设计的内在缺陷所致。

摘要：本文采用逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ），并结合ＰＣＲ产物直接测序法，证明人大肠癌细胞系ＨＲ８３４８和ＨＣｅ８６９３的ｋ－ｒａｓｃＤＮＡ片段（第３～８３密码子）中存在第１２密码子ＧＧＴ→ＧＡＴ突变，未发现其它突变或ＲＮＡ剪接异常．用分别与野生型和上述突变型ｋ－ｒａｓ第９～１５密码子互补的１８聚硫代磷酸型寡核苷酸（两者仅存在一个碱基差别）及随机设计的对照寡核苷酸（终浓度为６μｍｏｌ·Ｌ－１），发现与突变型ｋ－ｒａｓ互补的寡核苷酸能抑制ＨＣｅ８６９３细胞生长并有ｐ２１ｒａｓ蛋白表达量的抑制；而与野生型ｋ－ｒａｓ互补的寡核苷酸及随机合成的对照寡核苷酸对之无明显抑制作用，说明ｃ－ｋ－ｒａｓ反义寡核苷酸对ＨＣｅ８６９３细胞生长和ｐ２１ｒａｓ蛋白合成的抑制作用存在明显的核苷酸序列特异性．

摘要：为了弥补原核生物短期试验揭示诱变抑制剂之不足,建立了体外培养哺乳类V_(79)细胞微核抑制试验检测诱变抑制剂,并对该试验作了区分去诱变剂和抗诱变剂设计,辅以受试物对细胞生长影响,以揭示真正的诱变抑制剂。实验证明,大蒜素0.06mg/L、0.6mg/L能降低MNNG 0.1mg/L和环磷酰胺2mg/L诱发V_(79)细胞微核形成率(P<0.05),但它对细胞增殖亦有抑制作用。白术水提取液1.25×10~3mg/L、5×10~3mg/L在代谢活化系统存在情况下,可抑制环磷酰胺2mg/L诱发V_(79)细胞微核的形成(P<0.05),推测它可能对代谢活化酶系有揶制作用,有待进一步实验证实。

摘要：致癌物分子结构识别软件的设计与应用叶志前，华蕴博，徐庐生，章庆和，陆金芳，余应年（浙江医科大学生物医学工程研究所，浙江医科大学计算机中心，浙江医科大学医学分子生物学中心，３ｌ０００６）致癌物分子结构的计算机识别是利用已积累的生物学检测数据，用计算机对...

摘要：用~3H-TdR在不同时期标记细胞DNA,以区别在HpaⅡ限制性片段放射活性分析中的DNA系来自增殖中的或坏变中的细胞.实验证明MNNG处理后存活的细胞中并无DNA甲基化水平的变化.而经MNNG或Hanks液处理的脱落细胞DNA,在HpaⅡ水解前后其DNA片段的L_w皆明显降低,并可干扰对新复制DNA的HpaⅡ识别位点的分析.因此作者认为,在缺乏严格设计以除外上述因素的体系中,作出关于细胞DNA甲基化状态变化的结论是不可信的.

摘要：反义核酸技术具有实际应用的价值,它可选择性地阻断特定基因的表达,期望能用于病毒性疾病、肿瘤等相关疾病的基因治疗,也进行了实验性探索。在用反义技术抑制肿瘤细胞中激活的癌基因时,通常的设计并未考虑其特殊的突变序列而选用与野生型序列互补的反义寡核苷酸,这种设计就存在缺陷。本研究观察了反义核苷酸对抑制大肠癌细胞激活的ras基因表达及其生长的序列特异性。另一方面,采用完全互补的反义核酸阻断人类错配识别蛋白基因hMSH2的表达,分析细胞表型的变化,探索该基因缺陷的直接后果。

摘要：本实验室于1994年用人羊膜FL细胞株，经逆转录-PCR克隆了人细胞色素P450 1A1 cDNA，经部分DNA序列测定〔董海涛等，中国病理生理杂志 1995, 11(4):417-421〕. 并建立了稳定表达CPY1A1的转基因细胞，其表达产物具有乙氧基异吩口　恶唑-O-去乙基酶活性，建立的转基因细胞有代谢活化苯并［α］芘等多环芳烃的能力〔董海涛等，中国病理生理杂志 1996, 12(3):225-229〕. 现用T7，SP6引物和重新设计的中间引物，根据Perkin-Elmer操作说明书，用BigDye标记的双脱氧链终止法反应，再在本实验室ABI Prism 310全自动毛细管电泳测序仪上对重组质粒pGEM-3Z-1A1中的CYP1A1 cDNA片段全长进行测序(图1).

摘要：以AHH、FROD、ECOD及APND为标志酶、3-MC、β-NF、NE及PB为诱导剂证明人羊膜FL细胞系有可诱导的Cytp450IA及IB基因的表达,有较宽的药物代谢酶谱。EROD及APND的最大诱导反应见于3-MC与NE复合诱导时。基础和诱导的AHH具有Cytp448依存性混合功能氧化酶的特征。在诱导剂撤除后24-36h内,Cytp450同工酶的诱导活性仍维持在一较高水平。应用这种经过诱导的FL细胞在UDS及ADPRT介导的细胞NAD含量降低试验中确能代谢活化常见的前诱变剂/前致癌物。这种新设计可望取代肝微粒体代谢活化系统而用于诱变剂生物学检测。

摘要：本研究由于它的创新设计获1991年度卫生部科技进步一等奖。已在国内外发表论著33篇。主要内容有:1.非程序性 DNA 合成试验的改进本改进法以14C胸苷预标记的同步化培养细胞为测试细胞,从而在测量非程序性DNA合成的3H-胸苷掺入的比放射活性时可省略繁杂的DNA定量测定而以3H/14C放射活性比代替。