摘要：为了获得单细胞核的蛹虫草材料和制备原生质体的最适酶解条件,以蛹虫草芽生孢子为试验材料,通过荧光染色观察其细胞核数,以溶壁酶质量分数、酶解温度、酶解时间为试验因子,原生质体得率为响应值,采用单因素和Box-Behnken试验设计进行优化。荧光显微镜观察结果表明蛹虫草芽生孢子为单个细胞核。响应面优化试验结果表明蛹虫草原生质体最适制备条件为:溶壁酶质量分数2.06%,酶解温度26.1℃,酶解时间2.57 h。在此条件下,原生质体得率的预测值为8.97×10^6个/mL,验证试验所得原生质体得率为(9.17±0.29)×10^6个/mL,预测值和试验值差异不显著,回归模型拟合良好。在优化条件下制备的原生质体在含有0.8 mol/L甘露醇的再生培养基上的再生率达43.33%±2.08%。

摘要：为了获得超声辅助提取蛹虫草废菌质中类胡萝卜素的最适工艺参数,在筛选出最适提取溶剂的基础上,通过单因素和响应面法进行优化。通过单因素试验确定最适单因素条件:乙醇浓度70%、料液比1∶60、超声功率400W、超声时间20 min、提取时间15 min、提取温度50℃。在单因素试验基础上,选取乙醇浓度、超声功率、提取温度为自变量,类胡萝卜素提取率为响应值,采用Box-Behnken试验设计建立回归模型。根据回归模型,在料液比1∶60、超声时间20 min、提取时间15 min的条件下,确定类胡萝卜素最高提取率的优化组合为乙醇浓度71%、超声功率418 W、提取温度51℃。在此条件下,类胡萝卜素提取率的预测值为626.80μg/g,验证试验所得类胡萝卜素提取率为637.50μg/g。回归方程的预测值和试验值差异不显著,所得回归模型拟合程度较好,具有一定的实践指导意义。