摘要：目的:探讨烘箱烘烤对附子中双、单酯型生物碱含量的影响。方法:采用切片→护色→烫漂→烘烤的方式对附子进行加工,以双、单酯型生物碱含量作为检测指标,通过正交设计考察烫漂时间、烘烤温度、烘烤时间对附子中两类生物碱含量的影响。结果:随各因素强度的增加,双酯型生物碱含量减少,单酯型生物碱含量增加。10个加工品中单酯型生物碱含量均满足2010年版《中国药典》中对白附片、黑顺片、淡附片的限量要求,其中6个加工品中双酯型生物碱含量满足2010年版《中国药典》中对白附片、黑顺片的要求。结论:烘箱烘烤加工附子能满足2010年版《中国药典》对双、单酯型生物碱限量的要求。

摘要：采用改进的SDS方法提取黄连基因组DNA,利用正交设计研究方法建立黄连RAPD分析的PCR反应体系,成功地进行了RAPD扩增,筛选出黄连RAPD的最佳方案为:25μL反应体系中包括dNTPs0.12mmol.L-1,引物0.2μmol.μL-1,模板DNA 40ng,Taq酶1U,Mg2+2mmol.L-1,10×buffer缓冲液2.5μL,其余部分用无菌超纯水补平.PCR扩增循环为95℃3m in,38℃1m in,72℃2m in 1次循环;94℃1m in,38℃1m in,72℃2m in,45次循环,最后72℃延伸10m in.

摘要：以江油附子主栽品种为材料,采用随机区组设计,研究了稻草覆盖方式(整草覆盖、切割与粉碎覆盖)和数量对附子硝酸还原酶(NR)、谷草转氨酶(ALT/GOT)和谷丙转氨酶(AST/GPT)等几种氮代谢相关酶活性的影响。结果表明:各覆盖处理的酶活性水平均高于对照组,即秸秆覆盖处理均有效益;不同的秸秆覆盖量间差异性显著,覆盖量为1kg/m2的处理酶活性水平高于覆盖量为0.5kg/m2和1.5kg/m2的处理;虽然切割覆盖的酶活性水平高于整草覆盖和粉碎覆盖,但不同覆盖处理间差异性并不显著;切割覆盖1kg/m2处理的NR、GOT和GPT酶活性水平虽均为最高,但整草覆盖1kg/m2更能够达到较高经济效益的栽培效果;3种酶之间存在较好的正相关性,具有一定的协同作用。

摘要：[目的]探讨微波加工对附子中双、单酯型生物碱含量的影响,为附子新型炮制品及药食两用加工品的开发提供参考。[方法]通过正交设计、直观分析和方差分析,探讨烫漂时间(A)、干燥温度(B)和微波时间(C)对附子中双、单酯型生物碱含量的影响。[结果]微波时间对双酯型生物碱含量具有极显著影响(P<0.01),对单酯型生物碱含量具有显著影响(P<0.05);烫漂时间和干燥温度仅对双酯型生物碱含量具有显著影响(P<0.05)。最佳的因素水平组合为A3B3C3,即烫漂时间为3 min,干燥温度为60℃,微波时间为5 min;在此条件下,双酯型生物碱含量为590.33μg/g,单酯型生物碱含量为802.14μg/g。[结论]微波加工能够降低附子中双酯型生物碱含量,增加单酯型生物碱含量。

摘要：目的保证乌头ISSR-PCR的稳定性、提高对乌头遗传多样性,亲缘关系分析、种质鉴定的可靠性。方法收集西南地区23个乌头材料,以Mg2+,dNTP,引物和聚合酶建立L9(34)正交设计,并同时考察模板和甲酰胺浓度及退火温度,建立适宜的ISSR-PCR体系。结果以Mg2+2.0 mmol/L、dNTP 0.25 mmol/L、引物0.3μmol/L、rTaq酶1U、模板1.5 ng/μl、甲酰胺2%及退火温度(Tm-3)℃的ISSR反应体系最优。结论实验建立的ISSR-PCR体系反应稳定,能用于乌头的ISSR分析。

摘要：采用正交设计研究方法,建立了梨RAPD分析的PCR反应体系,成功地进行了RAPD扩增,筛选出梨RAPD的最佳方案为:25μl反应体系中包括引物0.5μmol.μL-1,dNTPs0.1mmol.L-1,模板DNA10ng,Taq酶1U,Mg2+4mmol.L-1,10buffer缓冲液2.5lμ,其余部分用无菌超纯水补平。PCR扩增循环为95℃3min,38℃1min,72℃2min1次循环;94℃1min,38℃1min,72℃2min,46次循环,最后72℃延伸10min。

摘要：运用三因素二次回归正交组合设计,试验研究了氮、磷、钾三因素对中药附子(乌头)的过氧化物酶(POD)、硝酸还原酶(NR),谷草转氨酶(ALT/GOT)和谷丙转氨酶(AST/GPT)活性的影响效应。结果表明:N、P施用量对附子NR、GOT、GPT均有显著的影响,除较大施用量条件下对GOT活性的施P效应>施N效应外,其余情况下对三种酶均为N效应>施K效应;施K除对NR活性有明显效应外,对GOT和GPT没有明显影响;N、P、K施用对POD活性无明显效应。单施N对GOT、NR和单施P对NR均为正效应,随施用量增加酶活性升高;单施P对GOT、GPT和单施N对GPT在施用量低于零水平时,随施用量的增加酶活性升高,超过零水平后随施用量的增加酶活性下降;单施K时,对NR活性则是在零水平时最低,低钾和高钾时NR活性均较高。对几种酶的效应中,仅对GOT存在施N与施P之间的互作效应,随着N施用量增加施P对GOT活性的增加效应更明显。

摘要：目的探讨九眼独活基因组DNA提取方法、ISSR反应体系优化及引物筛选,为研究九眼独活居群遗传多样性及原药材DNA鉴定奠定基础。方法采用改良的CTAB法与常规CTAB法对九眼独活的基因组进行提取,通过紫外、电泳、PCR-ISSR检测方法进行比较。结果实验表明,改良的CTAB法得到的DNA浓度和纯度较高,并可很好地应用于ISSR分子标记分析;以Mg2+、dNTP、引物和聚合酶建立L9(34)正交设计,并同时考察退火温度和模板浓度,建立适宜的25μLISSR-PCR体系为:模板30ng,Mg2+3.5mmol.L-1,dNTP0.6mmol.L-1,引物0.4μmol.L-1,Taq酶1U。结论以此体系为基础进行引物筛选,在40条ISSR引物中筛选出13条扩增条带清晰、多态性较高、重复性好的引物。

摘要：研究旨在通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从分子方面鉴定附子地道产区四川江油乌头花叶病植株的病原物种类及分析其特性。通过对黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV)的外壳蛋白基因(coat protein,cp)设计特异引物,对江油中坝附子GAP生产基地的乌头花叶病植株进行克隆、转化并测序。结果表明,从江油花叶病乌头植株中克隆得到基因大小为375 bp的片段,鉴定为黄瓜花叶病毒,命名为CMV-FZ,该序列为一段有效的长为375 nt的氨基酸编码区,推测编码125个氨基酸残基。依据外壳蛋白核苷酸序列建立CMV不同分离物的系统进化树并对该序列进行蛋白组学分析,CMV-FZ与国内外已报道代表性CMV亚组分离物cp基因的核苷酸与氨基酸的序列相似性为74.8%~98.2%和73.4%~99.2%,其中与CMV亚组II的核苷酸和氨基酸序列相似性为96.1%~98.2%和96.0%~99.2%,该分离物与中国分离物(CMV-PCT2)氨基酸序列相似性最高,达到99.2%。遗传进化分析显示,CMV-FZ与中国分离物(Zin和Hubei-1)和美国分离物(DKRD)亲缘关系较近,聚在同一分支,属于CMV亚组II。以上结果表明伴有花叶症状的乌头受到黄瓜花叶病毒的侵染。

摘要：目的研究不同种植方式、遮阴度及施肥对白及Bletilla striata产量和品质的影响,确定最适种植方式和栽培管理措施,为白及规范化、规模化种植提供科学依据。方法采用3因素4水平正交设计进行田间试验,研究种植方式、遮阴度、施肥对2年生“川及1号”产量、多糖含量、1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯含量的影响。结果不同种植方式与栽培措施对生长指标有显著影响;种植方式、遮阴度对块茎干质量、多糖及苹果酸酯含量有显著影响,施肥量对块茎干质量、多糖与苹果酸酯含量影响不显著。当采用覆膜栽培(A2)时,块茎干质量[(1784.51±100.01)kg/hm^(2)]、多糖[(39.04±0.28)%]与苹果酸酯含量[(7.72±0.45)%]均达到最高;当采用25%遮阴处理(C2)时,多糖含量最高,达到(39.31±0.28)%,无遮阴处理(C1)的苹果酸酯含量最高,达到(7.61±0.83)%。结论不同种植方式与栽培措施对白及产量与品质影响差异显著。“川及1号”适宜种植方式为覆膜栽培,采取25%的遮阴处理,高肥力土壤背景下150 kg/hm2为较适施肥量。